求教胎盘干细胞传代时酶消化的程度

chenzhengliang

各位大神，请问下胎盘干细胞做传代培养时，加入胰酶消化，大概什么程度多长时间可以加血清培养基终止啊，消化5min后显微镜下看到细胞变圆，变小，是不是这时就可以终止消化了？

枫之叶影

我们用0.125%的消化4分钟能脱落80%到90%，吹打下就OK了

孙帅帅

我们用的0.05%的胰酶，37℃消化一分钟就可以了啊~~

wangbo19880315

在显微镜下观察到细胞之间分开就可以了，终止消化过程要快，要按照加胰酶的先后顺序终止消化！不然会导致消化不均一！

piano尤尤

我用的商品化0.25%胰酶 1min 最多1分半
* ^3 R' ?1 O+ w; L" E只要细胞稍微变化 没有那么铺展 就终止
+ N- U, A- [3 Q' c2 D对于各种间充质我都是这么处理7 w3 [9 n9 B. v
不然传代后贴壁下来状态很差* f# H0 }0 t, u2 |1 m6 N! ^

wf78365421

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5 W0 z. z# ?# Z- c
: ~7 s6 [, j; f; E% k你用0.25%胰酶？如果是0.25%胰酶，用不了1分钟就可以终止。! e4 i' D/ v; Q7 p. Q1 F9 o- I
如果用0.125%胰酶，可能需要5分钟。8 L! o5 Y! w9 `- d3 }
消化时在镜下观察，细胞皱缩，轻轻一拍，细胞脱落，即可终止消化。

452359357

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4 \. y4 ^$ s( a5 {1 W( {2 T* |% z* i0 Y: S) y/ S4 ^& H) u* J- w
是的 把胎盘组织剪碎 37℃消化  随时注意镜下观察 当细胞开始变圆 有少部分脱落时加血清终止消化 稍微振荡 过滤 观察细胞是否大部分脱落 必要时重复消化一次 离心收集细胞