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这是我的实验方法,分离的细胞还不错,仅供参考:
3 H, G- C3 }0 G; N7 _$ r, R1.用含双抗的PBS运回实验室;1 Q4 {' S W% J0 v% H
2.用PBS尽量漂洗除去血液,用筛网刮下胎盘绒毛组织,剩余的血管组织丢弃;3 x3 f6 e# y. d3 n0 d
3.将绒毛组织用0.1% I型胶原酶,在37℃水浴箱间隔震荡消化1小时;
. h/ p0 r* L& k4 Y3 o4.先后用50目和100目筛网过滤消化组织;
. P+ r: A& s: [* c" \3 N, v5.收集液体,2500rmp离心5min;收集沉淀,4 j$ z* X* B6 D1 _- N3 h P: M) V
6.用含10%FBS的DMEM/F12重悬接种2个培养皿(10cm)。 |
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