请教：丝裂霉素C处理MEF

yaolinzhang

不知大家做ips时，用什么溶液来溶解粉末状的丝裂霉素C？处理MEF的用量是多少？先行谢过！

天龙八部

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0 c0 P1 d$ ?$ @" h谢谢！
5 U& \- P1 t4 D3 p0 Z请问丝裂霉素稳定吗？四度放半年的话。。。。我想放-20度，1年没问题吧？

细胞海洋

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zhanlixiang

首先感谢大家的回帖！-20可以储存多久呢？冻存后丝裂霉素的作用不受影响吗？

luyoude

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+ F2 Z9 g0 i; t7 P( u! M7 q
; f. \9 N2 D; u( a$ q8 ~我们用的是罗氏的，工作液的话都是现用现配，一般是先配母液放在-20中！

细胞海洋

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( E5 ~" M+ b$ w7 a
6 b2 I! ?4 Y% b6 c* [建议你发新帖提问

zhanlixiang

请教大家都用什么品牌的丝裂霉素C，配至10ug/ml后4°能储存多久？期待回帖，:handshake感谢大家！

supercell

配制溶液我一般都习惯视所处理细胞的培养基而定，如MEF建议HD或HD+10%FBS（FBS会对细胞有一定保护作用）；配制浓度按照终浓度是10ug/ml配制成10X或20X储存液，分装后冻存。使用时提前溶解，不建议反复冻融，4度放置不建议超过2周；使用浓度：即使是同一厂家不同批次MT，或者同一种属老鼠不同批次制备的MEF，都建议梯度摸最佳处理时间。

xld1984

当然是用PBS用了

lipenix

海正药业，医院里开的，几块钱一盒，2mg/瓶，加2ml PBS，成100X溶液，4度冰箱放置可用半年以上；: k7 c  ?: `) M: C" c4 S. R
如，配制5ml处理液，DMEM 4950ul，加丝裂霉素贮存液50ul，即为10ug/ml处理液，一般处理2小时；8 u6 }# R# b2 Z# C
处理后注意洗涤干净，这个对ES生长有影响，不能偷懒~~:P