如何去除细胞碎片

zhangjieyctc

去除细胞碎片，一般用的速度和时间分别是多少啊？

素心无痕

一般情况下，可以采用3000-5000转/分，离心5分钟，可使细胞碎片沉淀下来，取上清液即可。

zhangjieyctc

回复 素心无痕 的帖子) \9 K2 w6 }( F0 p/ m! x# u* E

# z% u& Y3 ]5 S* {" B+ U* C3000-5000rpm细胞不是也随沉淀一起沉下去了嘛？

歪歪

自然沉降20min

evial

素心无痕 发表于 2013-6-9 09:51 * `) q' z5 @9 N; y, z# ?) b; x
一般情况下，可以采用3000-5000转/分，离心5分钟，可使细胞碎片沉淀下来，取上清液即可。

: j) |' H7 d. Q2 E8 R这个速度细胞都碎了，全变碎片沉下去了。安全速度是不超过2000RPM

ytumuyangren

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2 [2 u9 Z; M# ^/ Q
4 |* a0 L1 E. k, G0 ^这么高的转速，还要你的细胞不？细胞都成碎片了。

jj2570782

低速500rpm左右 短时 2-3min

素心无痕

感谢战友们的批评指正。其实如何去除细胞碎片还是靠个人经验总结，比较常用的方法有1.自然沉降法，将细胞悬液置于离心管中，等细胞大部分下沉后，吸弃上清，如此反复多次，也可到达目的，但是还是会有少量的残留；2.离心法，转速<300-500g，5min，但是还是要根据不同的细胞类型来决定。当然也有人提出使用稀释法，不过本人没有做过。谢谢大家！

evial

300-500G?看不同的机器，这个转速是高的相当于1200-1500rpm左右，上面有位朋友说的是500rpm不是g哦！这是低转速，能够使碎片下沉但细胞还沉不下来。

zhangjieyctc

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4 p) C# x8 m, A
9 c& n  F* ^  |是的，300g我试过，相当于1200-1300rpm，这个转速肯定是不行的，500rpm，没试过。请问你们一般用多少的转速和时间啊