关于间充质干细胞实验技术问题~

tonyww723

酶的问题不大，不过时间不宜过久，如果是组织的话 不要超过30分钟到1个小时，孵箱内，需要加血清终止反应。
# y" U; K' d# X* C5 M不过看你的这个图，估计接种密度太低了，原代细胞如果量不大的话，最好放在培养皿养，标准的作法是看到克隆后，用tips挑出来，然后放在孔板里养，正常传代密度不要低于3000/CM2

tonyww723

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CO2的变化对细胞生长有影响，但只要孵箱保持5%的浓度就不会有太大问题，如果是传代后发生的，建议还是对培养基和接种密度进行确认。从我的经验来看，估计是传代后的密度计算有问题，如果培养基没什么问题的话，毕竟你传代前细胞长的还不错。如果传代前的细胞状态不好，那估计就是培养基的问题了

tonyww723

回复 liaoyanstudy 的帖子: J$ s$ _, B* o6 S: k6 ~, _  S

" g  z7 `0 `' {- i; r+ m加10%血清？ 这个体系一般不会出现太早的老化现象，你按照这个比例传代应该是没问题，可能要考虑一下是否是血清的问题。颗粒？ 细胞内的还是细胞外的？ 细胞外的话，应该是血清的问题。

tonyww723

回复 liaoyanstudy 的帖子8 v+ v3 Q" }4 W* q, G2 x
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不知道你原代细胞是否也是这样？ 如果是这种情况，建议重新建立一批原代细胞