PBMC掺杂红细胞会如何

小公

回复 easternliu 的帖子3 g% \7 u7 x: y6 j
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用的GE 的FICOLL ,之前几次是先用淀粉沉淀红细胞，取上清再进行分离液分离，这两次是直接分离的，明显后面红细胞很多，估计是和稀释有关的，稀释倍数低，红细胞密度大，容易下沉，再往分离液加血时候，很快就有红细胞沉降，液面分层不清晰，会影响的，我用的400g,30min ，

easternliu

回复 流泪的鱼 的帖子9 J) v& L" D- r" u( L5 N, }
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加速度都是降到最低，这没问题，，谢谢你

流泪的鱼

你的上升和下降的加减速度怎么设定的？掺杂红细胞和离心方式有关。

流泪的鱼

你的上升和下降的加减速度怎么设定的？掺杂红细胞和离心方式有关。

流泪的鱼

如果掺杂的红细胞太多，就用红细胞裂解液处理，但是时间要短，否则影响单核细胞的分裂增殖哦。如果红细胞不太，就不用红细胞裂解液。毕竟，红细胞裂解液也会影响单核细胞。

fay898

贴壁培养纯化细胞，但细胞计数、接种密度上会影响目的细胞的生长~~建议PBMC用红细胞裂解液处理一下再培养吧~0 \0 Y/ v8 B1 j7 \8 a2 K- k

呼吸

如果红细胞比较多，用裂解液裂解一下，掌控好裂解尺度。如果红细胞少，就没必要管它，它会自行裂解掉的。

easternliu

回复 小公 的帖子% d$ J3 h/ y1 X
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是的呢，这正是我现在面临的问题，你们离心力大概多少G呢，应该适当提高离心转速吧。混入红细胞后，是否会引起细胞的粘连呢

小公

红细胞过多，对单核细胞的生长肯定存在影响的，与生存空间都有竞争关系，最好是进行优化分离液和离心参数，我用FICOLL分离脐血，有些标本本身就是容易白膜层混有红细胞。

刘艳85

红细胞太多，用显微镜不易观察，据我们的经验，对PBMC的生长影响不利