PBMC掺杂红细胞会如何

jenvy121

不建议用红细胞裂解液，影响表型，而且会损失很多目的细胞，建议第一次分离后养上3-5天，然后再次分离，这样很多红细胞就能分走了。

meister

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红细胞没有太多影响， 不用管它

easternliu

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. A1 d( W6 v; g9 h. l( ?! E
) ?& c$ S( y5 {, C$ }% C哦哦，能推荐一下牌子吗

小公

回复 easternliu 的帖子8 _3 C7 q# n, b

& d: n# B, v) }& ]/ U) W! [不是医用的，是沉淀红细胞专用的，羟乙基淀粉

小公

回复 yanwu_1 的帖子' X4 g( v2 z- W5 O' G4 Z
6 H- U3 L4 y9 L4 t, C/ T" O' C
是的，裂解之后明显很多碎片

easternliu

回复 yanwu_1 的帖子. @0 g% P# ~1 f& q* y" o2 Q

/ |8 E+ P' L% M* V  J4 y: G/ l我现在遇到的应该如你所说，蛮尴尬的，正着力解决这问题

easternliu

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( L8 A* k  X1 x1 m, d
, y+ ~3 I9 N3 d. b  [$ X7 a8 Q能告诉我你们用的什么牌子的淀粉么，一般药用级的可以用否

yanwu_1

就我个人的经验来说，少量的红细胞对单核细胞的增值是没有显著影响的；但红细胞太多的话，在红细胞裂解之后，细胞碎片或者（蛋白？）会粘连细胞聚成团，极度影响细胞增殖，甚至会增值不起来。个人经验。

weijunning

如果红细胞太多，分离当天用裂解液稍微裂解一下即可，待细胞生长到5天左右，再次进行深度裂解，这样对PBMC的损伤小一些，而且红细胞也更易裂解，裂解效果会好。  

easternliu

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, t; o# f9 M& _# F+ w6 Y8 q# ^$ c3 W' f
你是做的脐血么，做外周血用400g30min应该是完全没问题的。看文献，淀粉直接就低速离了（60g10min），或者自己沉降1h，一直没试过用羟乙基淀粉来做，给点建议吧