CIK加液后产生絮状物，大家来分析一下原因！！！

sunny.yc

回复 lyj-0017 的帖子
" W6 P+ O3 x. ^8 {9 |/ E" o& x5 t' {; z6 c: @& ^6 F
一个解释是，细胞受细胞因子刺激过度，有些患者的细胞不太能耐受细胞因子刺激" X2 _( |+ D0 ^% {: l, I9 t/ b" V
还一个解释是，自体血浆没有灭活
; c# \4 W" Z. P3 u9 m6 a; _4 n9 Q: ]& s; c& q; u* A0 V
还有，培养基预热的话，可以扔培养箱也可以水浴，不过我不太建议用37℃，25℃就可以，我个人的经验是觉得37℃对培养基里的成分损失比较大0 ?1 T2 g; Z9 r- o3 R
* G4 M$ D/ V' `7 f' y' w+ b0 ^
以上都是个人意见，望有高手点评

sunny.yc

回复 lyj-0017 的帖子
8 R& D7 N7 W+ K9 S5 f  H: d- T
0 L) ~& a; K$ G如果实验室有HH-1的水浴锅，那1L的培养基瓶子正好可以放进去，培养箱不太好，因为培养基瓶子也不一定干净，你不能保证你的冰箱就完全无菌吧，如果带进培养箱反而不好，弄不好污染了培养箱里的细胞，而且水浴锅水导热也比空气快，所以还是水浴锅吧。! f9 u( B6 @# [
培养基变紫这个问题，在培养箱或水浴锅都是一样的，因为你都是瓶盖拧上的，所以，没啥区别，再说培养基也是个缓冲体系，酸碱度变化不会很大的。
' S  }) l) ]4 t  l8 j1 E& b. |4 l
还有，我觉得，有可能是IL-2，最近翻了一下Rosenberg主编的《癌症生物治疗——原理与实践》，里面有几句话对IL-2的描述是这样的——鼠剔除IL-2后，可使T细胞过度且无法控制地增值，因而提示IL-2不是T细胞在体内生长的必须因子，而是T细胞凋亡所必需。

sunny.yc

回复 lyj-0017 的帖子$ m/ R% h' h2 i

0 b" G, k2 y8 [2 l' b" O# O0 m) L你试一下100ng/ml和1000U/ml吧，2000U/ml的IL-2实在是有点高了，大多都是300U到1000U，2000U我也是第一次听说
, \2 V: X% u$ W" Z. N) K% `/ `4 L7 E. p6 M- P2 {/ Y
不过，如果你现在才更改浓度，对于这份细胞来说，我觉得意义已经不大了，不过在对以后的实验肯定是有帮助的，2000U/ml，有点太高了

sunny.yc

回复 sunny.yc 的帖子, p; i' Z- x+ W: X
: W! o' U7 }8 m( i5 E. ~1 J  Z$ i
还有就是，CD3单抗也只是前期才用到，所以，对于之后的扩增影响不是太大，而且单抗一般都是作为前期一次刺激就可以了
7 ~( _' y9 v. p- f6 B% W% ]9 K( _7 j$ y" m6 w# m2 C( U4 H5 J. @& ~
你不会一直在添加单抗吧，呵呵

sunny.yc

回复 lyj-0017 的帖子
4 c4 `$ ?( j6 T$ H* C) d* k' i. u! `" G
IL-2基本上都是用临床级的，试剂级的太贵了, e7 B4 s' Q5 i$ |/ L% ]7 o
IL-2你先试一下1000吧，基本上都是这个使用量的$ e( V5 m4 X; N* v2 q

* L6 S3 m  j8 d  G( v  ?+ n1 lCD3单抗也不算高，如果你只是前期加，100ng/ml 应该问题不大，我做的培养体系也是这个浓度，基本上没有什么问题

sunny.yc

回复 lyj-0017 的帖子5 J- K+ Z* o- U, {7 A+ p) J! n

4 s8 @; k$ z0 Q1 Z* K0 y1 I9 a你的量是从哪看到的，都太高了吧，试试1000单位的干扰素γ，D0天一般只加干扰素

sunny.yc

回复 lyj-0017 的帖子) ?2 N. P8 ^% G! p

$ L+ d: Q5 T) g- Y* a- Q: t你的量是从哪看到的，都太高了吧，试试1000单位的干扰素γ，D0天一般只加干扰素

sunny.yc

回复 lyj-0017 的帖子
: I' x2 K# b* U' v
/ r8 t2 @4 ^' y8 \建议还是分开加，挺多文献都有这样的描述，而且理论看起来都很合理的
! S* f5 d% }* @+ G: z* \" V
! g. {3 ?# \/ v' s如果你还是在纠结的话，建议你连续做几个平行实验看看，可能对于你的培养体系来说，D0加一种或加三种影响不大呢

sunny.yc

回复 lyj-0017 的帖子8 e- j' r" \4 c. k

$ R! d# L! G' X% ^可能我了解得还太少，持续加干扰素还是第一次听到，试试看吧！