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细胞培养需要器械、耗材和培养液。当年在大学的时候学免疫，老板只有一个细胞培养室，还是上个世纪90年代的标配。于是大四果断被拉去当苦工刷试管、培养瓶、移液管。。接触了最原始的灭菌方法——高压蒸汽灭菌。' ^4 t% N- q) q }5 f
其实该灭菌法在大二的微生物实验就用过了，不过我们微生物实验室很有钱（当时号称全国前五？），用的是立体大容积的自动化灭菌锅。因此也就没在意。直到大四分了小专业，跟随一个做派古板的老师打酱油，管理一个随时可能报废的掉漆绿皮高压锅，方才启蒙了我海马沟回中时有时无的无菌（sterilization）概念。
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# Q2 k2 i2 `5 O& J- h% k我到现在也不知道是否该感谢这位思想古板的老师，正是在他实验室打了俩月零工之后，我厌倦了无休止的苦工生涯，果断放弃考研出门工作，半福半祸地进了医院开始细胞治疗（cell therapy）的坎坷生涯。幸运的是，我踏入了一个现代化的标配实验室，不幸的是，管理这个实验室的是上个世纪八九十年代走过来的前辈，于是有幸见识了很多古董级别的灭菌方法：2 n3 S# G' \% h% m' U4 E. J
火焰灼烧法2 R7 m8 _! z! F5 i
无论在哪个实验室，高压蒸汽灭菌依然是主流，区别仅仅在于自动还是半自动，1L还是10L。但是其动辄2h的漫长消毒过程，往往满足不了急性的刚需。于是在特殊的时候，我们不得不祭出一个非常规的方法，比如说，利用火焰动辄六七百的高温，瞬间杀灭微生物。方法可以多样，万变不离其宗。可以用酒精纱布擦拭器械，然后直接用镊子夹住在酒精灯上方来回灼烤；可以将器械放入托盘，浇入酒精，直接点燃灼烧。。。* z$ y2 E' |, ^2 v+ n, Y: T0 S+ ]
高温干热消毒
0 O: K8 ?( S( _6 j$ T曾经在医院碰到一个问我要废旧注射器给孩子当玩具的大妈，我说不能给怕传染，她说没事她可以回家蒸蒸，我和小伙伴们当时就惊呆了，我惊讶于她的智慧，感动于她的母性，然后拒绝了她。但是她的想法给我们提供了一个很好的思路。在碰到一些个特殊的不能沾水汽更不能沾酒精的特殊物品消毒的时候，我们直接把它塞到烤箱内，200℃，1h。 \9 k5 h' a" B% G6 q, c. F
微波炉灭菌
; | ~9 Z$ f+ P2 p& |据说这是我们原来学校某大神的创造，灭菌耗时仅5min。主要应对突发的急性需求，通常灭菌的对象为枪头盒。操作方法为将枪头盒用保鲜袋包住，四周加以冰敷，塞进微波炉中加热2次，2min/次。
3 J( i* x# L ^5 F* V. s酒精浸泡
' c. w( U, N, I8 o X/ ~1 ~75%的酒精是常用的医用消毒试剂，因为它能很好的破坏微生物的生物结构，使蛋白变性内环境紊乱等等。在细胞爬片的时候，我们经常用的无菌盖玻片，就是清洗后浸泡在75%酒精中，使用时直接风干。此外，有一次实验室小鼠意外怀孕剖出了七八个胎鼠，我还用酒精紧急浸泡消毒，然后取其内的胎盘培养MSC，竟然也成功了。$ J, F( n4 A: H% O' v# F! r
以上且做抛砖引玉，标题为标题党，大家还有其它优良的灭菌法一起分享下？比如戊二醛熏蒸、伽马射线消毒如今我也只闻其名未详其情。 |
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发表于 2013-7-9 19:01
“有一次实验室小鼠意外怀孕剖出了七八个胎鼠”楼主果然厉害
发表于 2013-7-11 11:33
