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[请教] 关于质粒抽提的问题 [复制链接]

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楼主
发表于 2013-7-14 21:57 |显示全部帖子 |倒序浏览 |打印
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我最近抽提质粒用来做酶切鉴定,可是做了好几次,每次在抽提步骤中的蛋白沉淀,离心沉淀老是停留在中间,导致上清只有一小部分,在下面有一部分,导致不好吸下面的,使得抽提的质粒浓度低,而且不纯,刚开始以为菌液浓度太大了,于是摇了一次少的,可是还是会出现之前的情况,请问谁有遇到过,或者能够解决,感谢回答。
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沙发
发表于 2013-7-15 22:06 |显示全部帖子
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0 v9 T. _5 ]" B1 u  |: N& o) d5 Y9 k
恩,应该不是我也是用的12000g,而且离心时间加长了,还是不行,这个情况应该排除了呢
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藤椅
发表于 2013-7-15 22:07 |显示全部帖子
回复 xld1984 的帖子6 m0 k; R7 X* A% ?) W. v
0 ~7 d( ?+ {! v" T" |9 I5 R
就是用的试剂盒,用的是transgene的中提试剂盒

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板凳
发表于 2013-7-15 22:10 |显示全部帖子
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* B9 M4 t# _8 o1 s
灰常感谢,用中枪头的建议不错,下次我试试,不过下面的不要的话,上面的太少,感觉质粒浓度仍然高不了。但是我同时做的实验,帮别人提质粒就能够离下去,好奇怪。
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报纸
发表于 2013-12-8 12:15 |显示全部帖子
回复 Dancmacabre 的帖子
& f! ~' n" P8 D0 t1 \2 m. k2 e
已经解决,感谢各位帮忙解答,应该是我用的菌液太多了,蛋白沉淀太多造成的,后来用5ml菌液成功搞定
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