CIK 培养血清问题

meister

免疫细胞治疗大家都说用无血清培养基。 有做过添加FBS和不添加的对比吗。 无血清培养临床应用是否可行？

weijunning

回复 meister 的帖子2 a, t; f& H9 l4 h5 j* g+ j

# I  ]/ `6 O" y. _8 N0 e8 a无血清培养临床上当然可行了。并且无血清要比用FBS培养的细胞数量和细胞有效免疫表型上有很大提高，我们做过此对比。

xiakexing

现在临床上一般都提倡甚至要求无血清培养，好的无血清培养体系培养的细胞无论是在细胞数量还是细胞细胞质量上，一般都不低于甚至高于FBS培养体系，无血清培养基的优点：
% m, _9 m' s* ~- _9 J- @# |1. 可避免血清批次间的质量变动，提高细胞培养和实验结果的重复性。
0 ?' e1 b$ v, l6 v1 e" w2. 避免血清对细胞的毒性作用和血清源性污染。 & f! I: N+ r3 ~6 e# h
3. 有利于体外培养细胞的分化。
# f- a  w; k2 g. y) S5 |0 |8 `1 r4. 可提高产品的表达水平并使细胞产品易于纯化。
' z" u" ^1 I7 M) ~5. 组分稳定，可大量生产。, g4 W$ Y; R: t4 F, b+ I1 a
6. 不含有丝分裂原抑制剂，可以促进细胞增殖。
9 n4 B9 ?( h8 U3 q/ k1 j9 B' }3 m无血清培养基的缺点： 4 Z% T& Z/ y- g! T
⒈ 细胞在无血清培养基中易受某些机械因素和化学因素的影响，培养基的保存和应用不 如传统的合成培养基方便。     
0 Q4 P0 f( `5 b) E2.  成本较高。
6 n! t$ w- K+ W' e3. 处于发育的不同分化阶段的细胞(例如干细胞与定向前体细胞相比)需要不同的配方，对生长因子和细胞因子的选择尤为重要。而且在去除血清的同时，也去除了一些血清蛋白具有的保护、解毒作用，因此对试剂、水的纯度和仪器清洁度的要求更高。5 Y7 o, {9 F" f

meister

回复 weijunning 的帖子0 F1 B9 u+ Y8 P3 a1 W+ W
3 m' q. W; i$ P3 B( o/ ^
你们是完全不加血清， 还是加自体血清呢。 我们比较了一下， 不加血清的情况下， 无血清培养基扩增效率明显降低。

呼吸

我们做的是 用无血清培养基然后加少量自体血清，效果很不错。

meister

回复 呼吸 的帖子1 D; f  w8 Y; N' `+ D+ t+ t
6 w# `) q' X/ o- W: F8 @0 `( S
自体血清不是很稳定而且数量受限啊， 你们怎么解决呢？尤其是癌症晚期的患者，自体血清可能质量更差。

weijunning

回复 meister 的帖子; ], i% ?- [  C* Q/ b
3 c2 l7 y( Q) R" H0 T
我们只是在培养的前六天加一些自体血清，顶多40ml。

meister

回复 weijunning 的帖子* H: N/ q/ x- G- x' a: m: A/ [4 t
; A  F+ x% }& b1 T/ z
前1周加血请， 后些天不加，到也可以， 我们尝试过， 效果略微差些。

meister

回复 meister 的帖子9 \* C2 [, v5 I& G
$ E/ x' z) V% s7 j! S( X& J
其实所谓的无血清培养， 只是自体血清培养， 也可以说是低血清培养。 完全不加血清估计是不行的。

jianglei_sd

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" K8 R& A6 v9 n, K3 m+ Q" n9 V" s' I( s) [5 @! t9 d
我在培养的时候发现前一周细胞的增殖不是很明显，反倒是一周后快速增殖，可不可以反过来前一周不加或者少加，一周后再添加自体血浆呢？