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楼主: qq007www
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请教在胚胎干细胞培养过程中去除分化的细胞的方法   [复制链接]

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楼主
发表于 2013-7-25 09:44 |显示全部帖子
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传代时不离心,让细胞团块自然沉降,小心吸掉上清,重复三次,也可以除掉分化的细胞
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沙发
发表于 2013-7-25 10:02 |显示全部帖子
我们用的dispase酶,主要用于消化细胞团快,不是哺乳动物来源,效用比较温和,稀释就能灭活。
1 C6 m$ M4 y) [7 A细胞传代我们都是离心的啊,不离心是怎么做的我不是很清楚,用dispase酶消化下来之后稀释五倍或五倍以上,离心800rpm,然后弹散细胞,加ES培养基,将团块小心吹打至合适的大小,1:6或者其他的倍数接。
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藤椅
发表于 2013-7-25 10:08 |显示全部帖子
自然的沉降对细胞的活性影响不大,ES细胞不是以团块消化下来的嘛,那大的团块自然就比分化的单细胞沉降的快,这样反复沉降几次也可以去除分化的细胞,但是这样可能去除的不完全,所以分化不严重的时候可以用
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