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请教在胚胎干细胞培养过程中去除分化的细胞的方法   [复制链接]

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楼主
发表于 2013-7-23 17:10 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
请教各位大虾,因为在最近的干细胞培养过程中,经常出现细胞分化,郁闷异常,想问一下怎么样改进实验方法避免这种情况,还有就是想问一下各位大虾怎么把分化的细胞给去除的好方法啊,谢谢各位了
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沙发
发表于 2013-7-24 09:12 |只看该作者
在镜下标记好分化区以后,拿会培养箱,再把标记过的区域用tip头全刮掉。。换液。。
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藤椅
发表于 2013-7-24 09:40 |只看该作者
如果说是有条件的话,实验室无菌条件很好的情况下,建议你可以使用1ml注射器的针尖部位将已经分化的细胞给轻轻刮出掉,这种方法我们原来实验过,还是比较可行的,对细胞损伤比较小,如果没有这个条件的话,可以采用楼上建议,但是可能对细胞有一定的损伤,祝你顺利
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金话筒 优秀会员 帅哥研究员

板凳
发表于 2013-7-24 10:22 |只看该作者
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我们实验室是在显微镜下操作的,用挑克隆的玻璃管在火上烧红拉长,无菌镊子去掉头,然后对分化细胞进行刮除,或者挑取未分化的到一个新的培养板。还有就是直接用一次性的巴氏滴管进行刮除分化细胞,我们一般用巴氏滴管在显微镜下直接刮除,不过在实验之前要把培养房紫外灭菌1h,千级或者百级才能做。
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报纸
发表于 2013-7-24 14:42 |只看该作者
回复 gghywtfz 的帖子
# @  h$ N- t0 f5 D8 l  P
; f9 s' s+ K4 r# _! }0 G5 s/ S因为可能有很多分化的细胞,这样对做下来对细胞是不是会有很大损伤啊,
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地板
发表于 2013-7-24 14:43 |只看该作者
回复 daiying5200000 的帖子, s) f) f) P& @5 I3 A1 s! E8 |7 n& P
0 `0 P) h) X$ z. [9 `
大面积有分化现象的话,这样会不会很麻烦啊,有简洁一点的方法吗?

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发表于 2013-7-24 14:45 |只看该作者
回复 qiushuiwuhen 的帖子, J1 E, E# R8 Q& `
7 e$ g2 Z, ]5 u4 L3 ?4 [9 d: d
之前尝试过楼上的方法,可能是手法问题,感觉对细胞还是有不少损伤的

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发表于 2013-7-24 14:46 |只看该作者
回复 daiying5200000 的帖子1 @( |& W2 n. P  U0 ~% y

: Z" F! o' C, i: K1 t, X主要是实验室没有毛细管,所以这个做不了

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金话筒 优秀会员 帅哥研究员

9
发表于 2013-7-24 15:33 |只看该作者
哦,在显微镜下用巴氏滴管刮还是很快的。养干细胞就得这样,除非你用非常昂贵的培养基就会分化少,那样可以几天不用挑克隆。
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发表于 2013-7-24 16:53 |只看该作者
把还没有分化的克隆挑出来传代,每天换液,加快细胞克隆的生长。
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