脐带组织贴壁要多久传代

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- H0 M% ]9 U; D1、原代组织贴壁法爬出的细胞大概在12到15天之间传代，多数是13天或14天（培养基不同可能需要培养的天数也不同）。由于细胞爬出不能人为控制，因此每个培养皿甚至不同区域的细胞密度差异都较大，评价是否需要传代主要看单个培养皿中的细胞集落中心区是否已经长满细胞，多个集落需要大多数达到此标准，此时如果论单个皿的细胞密度肯定达不到80%左右，如果能到60%就已经算比较好了。如果按书本上说的达到80%左右，那么细胞集落中心部分就已经大部分脱落或老化。
" c, f. V8 p9 @; A2、10cm的培养皿只加1mL胰酶即可，适当倾斜培养皿将胰酶盖过培养皿的每个角落即可。胰酶可以不加EDTA，加EDTA的胰酶消化的太彻底了，形态不好的细胞也能同时消化下来，可能纯化效率会降低。胰酶浓度根据你自己细胞的情况来定，0.08%通常就可以了，如消化效果不理想就考虑加大浓度0.125%或0.25%。9 p. T$ O- h5 k7 Q; y$ Y/ |( r  F3 V# ^3 |
3、离心如一楼老师所说没有特殊要求，1200rpm，5min就可以。离50mL离心管的离心机半径不会相差太多。