qpcr异常结果

goblinwang

请教各位大侠，qpcr结果为啥会是这样，下面两张图显示的是目的基因的扩增曲线和溶解曲线，

2013-8-20 20:08 上传

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2013-8-20 20:08 上传

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随后我对该基因的PCR产物进行电泳

2013-8-20 20:11 上传

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，最后我进行CT值分析的时候软件却显示未检测出信号，无法给出CT值，很是奇怪，虽然扩增曲线不好，但是溶解曲线和电泳图谱显示的结果和我预计的差不多，尤其是电泳条带大小和预计的一样，，，想请各位大侠帮忙分析下原因，仪器是AB公司7500，软件也是配套的，很是费解啊，求解释，先谢过各位了，

goblinwang

回复 fay898 的帖子$ g8 p: F5 x7 w6 ?! ?6 B& }
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谢谢你的回复，CDNA的浓度是100ng,我的内参就没这个问题

2013-8-21 15:54 上传

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，刚开始我以为是目的基因本底表达低，所以扩增慢，但是看到电泳图后，我觉得不太可能，毕竟产物条带挺亮的
# L8 b$ X* w1 D, E; r8 k  q

goblinwang

回复 fay898 的帖子" `' [) K, X2 y
3 M) p5 t# S( b& `/ @1 [4 K/ _
谢谢赐教，目前我用100ng模板做的所有基因都在这个范围内，除了这个异常的，所以求教各位了，解释什么原因。

goblinwang

回复 hormone008 的帖子
1 ]! n9 J) w4 n1 U; L% s2 y
) t( A1 T+ y' U谢谢，可能我下次做得要将这个基因单独处理，提高浓度，同一批处理其他基因都挺正常，这表达量低，应该是与其本底表达低有关，下次我试试。谢谢了

goblinwang

回复 redmaple 的帖子
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设计引物时，所有目的片段我都控制在100-200bp