悬浮细胞球的免疫染色方法

changbaihou

刚接触悬浮干细胞球的培养，想请教一下对于这种细胞的免疫染色，有几种方法？$ c' R+ L1 m; b3 Z7 T7 R  P8 ]
1，直接染悬浮的干细胞球% b, D3 z3 Q( q/ W/ h# ?9 E' k
2，传代，让其贴壁，然后染色
. S' {9 I# L$ k4 @请问常规方法是什么？还有其它可行的好方法吗？

初来乍到者

回复 bin 的帖子4 S" w* E! c% H3 P. k1 w

" j- k7 p3 r' i. T$ X4 r用PLL或Laminin的玻璃片是什么样玻璃片

wujian

做免疫荧光也是不错的选择吧

小渝

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  v: s! r! F2 M2 m( [/ @8 T
3 q9 T: k' P5 y+ }3 z/ w& E. d我试过，通过包被玻片然后是细胞球贴壁，关键是看什么细胞，我的是神经干细胞球，大概2h左右，如果太久细胞球就散开了，如果太段贴壁不牢固，在处理中很容易掉

changbaihou

回复 bin 的帖子( k" v+ j+ N; Q, I
( n- ]0 \0 H  x# t: n6 K2 o/ f% E
多谢，我是想让细胞球消失，细胞在片子上贴成一层。
/ Y) ^% ~7 F1 |+ c, H5 n* q3 |- e! J
看来不需要充分吹打细胞球，把他们分散成单个细胞，他们会离开细胞球，自己往片子上爬。

bin

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* `3 J4 Z/ E9 S( Y# R* C6 f) f( m  U; K
我不知道你说的细胞贴壁是指什么，细胞球可以贴在玻璃片上，如果时间太久球中的细胞就会趴下来，但是时间不够的话在染色的过程中细胞球很容易掉，所以贴壁时间是非常关键的，我以前做的时候是不加血清，贴1-2个小时细胞球就可以贴好，但是有些细胞已经开始爬下来了，你可以在一个玻璃片上贴很多球，最后拍照片的时候拍好看的就可以了。
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changbaihou

回复 yuanshenyewu 的帖子' G0 c" E! X/ |; j- G

9 Z% p! y, \' @$ Y5 \中间的细胞由于团块过大，失去营养而坏死发黑，失去正常的结构和折光性。

yuanshenyewu

中间坏死是怎么看出来的呢？被包在里边，我原来一直以为是保护里边的重要细胞呢

changbaihou

回复 yuanshenyewu 的帖子" T3 N9 e, J1 o8 \( I! I

. g- _2 S( o6 Z% u+ k! g  e; b9 r  I我养的第三天开始成球，很快超过200um，然后就开始互相融合、中间开始坏死。

yuanshenyewu

我养的球才100微米，肉眼刚可以看到，楼主养的球多大啊？1 K+ D. A( H4 r, {+ U