骨髓间充质干细胞自发成骨分化问题

light_blue

全骨髓贴壁法提取的BMSC，本来想做成骨诱导的，结果发现3代细胞普通F12培养液培养就有钙结节，6孔板每孔5万细胞数接种，6天就有很多钙结节。请问各位老师战友们有遇到相同的情况吗？怎么解释呢。还做了茜素红染色与骨钙素的荧光染色，都有很强的的阳性反应
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light_blue

回复 mjc588 的帖子* ]0 q: M- k; B  e* J- z  y! h1 }. q/ i6 ?
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条件血清都一样，因为是一起养的，我感觉还是鼠种的问题。

mjc588

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3 V# e* _# x9 K6 c9 m3 \+ z那就回想一下，在提两种BMSCs的时候，各种条件是否都一致，如果各种条件操作都一致那会不会是小鼠本身状态的问题？

light_blue

回复 mjc588 的帖子5 ~' ^8 y" g8 D; y  i

9 g% W- q) n; Z使用的是5周龄左右的鼠，我做的大鼠的BMSC传代一直很好，小鼠的养到3代不行了。

mjc588

我之前也做过骨分化，但是和LZ这个不一样，LZ可以和文献中的图片比较一下。第一幅图片，我也觉得是细胞老化产生的团块，不知道LZ提原代细胞时是否用的幼鼠bone，根据我自己的经验，成年鼠提的BMSC只能养到P3。

light_blue

回复 xulingous 的帖子! Y- r4 P4 K2 u  u2 G

. v- D  A* N# a2 J% S& F( ]以前做的21天诱导，gibco成骨诱导试剂盒。

xulingous

回复 askage 的帖子/ e; l& P: I( |4 z
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有道理·

xulingous

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9 K! u& m; \& N- B* `. A
2 Z$ g4 Y7 Z1 `6 S请问这个是成骨诱导多少天的？诱导体系是什么？谢谢啊~~~

xulingous

回复 light_blue 的帖子6 }+ N' m% J6 h* G% t9 @* W! W4 b

, v4 y7 x- P  F8 Y0 c2 h原来这是钙结节啊 没有茜素红染色的时候好像就一团团的 我之前以为是细胞比较密所以扎到一堆死了。。。。

light_blue

回复 askage 的帖子% ], L. v' e: t# q0 T) i& y4 e& m

! }- z: I% A8 `+ R8 m. q既然能自发成骨分化，地塞米松诱导也没有必要了吧，我做的诱导组成骨效果还没对照组好..