骨髓间充质干细胞自发成骨分化问题

light_blue

全骨髓贴壁法提取的BMSC，本来想做成骨诱导的，结果发现3代细胞普通F12培养液培养就有钙结节，6孔板每孔5万细胞数接种，6天就有很多钙结节。请问各位老师战友们有遇到相同的情况吗？怎么解释呢。还做了茜素红染色与骨钙素的荧光染色，都有很强的的阳性反应
7 u- l9 q8 y3 _* ~9 @0 f' g! E. `3 q6 I( o4 p
6 M( c" J; _2 Y$ k

% X4 S0 Y6 ~7 t1 n2 u- r7 E1 J& S

chichao0000

请问茜素红染色阳性结果是第一幅图吗？成骨诱导后的茜素红染色你做过吗，一样吗？我做的Alizarin red S染色阳性结果是类似油红那种红，和你这几幅图不一样。

light_blue

回复 chichao0000 的帖子! `) i9 ]7 l8 ~3 h
% r( }9 g( o- |* X; a
这个是没有染色的图片，茜素红的图片是这样的：9 N4 b& [2 L% A9 i4 F8 Y9 K

1 C# R# A2 O4 m* J3 h& O- F" n这个是40X照片。

askage

MSC确实具有自发成骨现象，我做的是脐带。一般是细胞养久了，【高密度情况下】容易发生。

light_blue

回复 askage 的帖子9 r7 w) q0 ^5 W2 X& Z  h

" U3 ]+ X& V3 J0 w) m( s5 X. o既然能自发成骨分化，地塞米松诱导也没有必要了吧，我做的诱导组成骨效果还没对照组好..

xulingous

回复 light_blue 的帖子
; P4 {0 U' k+ \8 Y1 N8 E/ e. _4 B; P
原来这是钙结节啊 没有茜素红染色的时候好像就一团团的 我之前以为是细胞比较密所以扎到一堆死了。。。。

xulingous

回复 light_blue 的帖子
" L' q. E/ w+ R+ {) R& U2 J2 ]3 ?; l0 |5 \, F. h
请问这个是成骨诱导多少天的？诱导体系是什么？谢谢啊~~~

xulingous

回复 askage 的帖子/ d, z! J6 T9 A+ h3 a, ]+ w1 Y

: b- D+ B; C6 f" h有道理·

light_blue

回复 xulingous 的帖子/ D- V2 e6 H( t3 |$ G
9 ~. T& J* ^# m0 t' y
以前做的21天诱导，gibco成骨诱导试剂盒。

mjc588

我之前也做过骨分化，但是和LZ这个不一样，LZ可以和文献中的图片比较一下。第一幅图片，我也觉得是细胞老化产生的团块，不知道LZ提原代细胞时是否用的幼鼠bone，根据我自己的经验，成年鼠提的BMSC只能养到P3。