骨髓间充质干细胞自发成骨分化问题

light_blue

全骨髓贴壁法提取的BMSC，本来想做成骨诱导的，结果发现3代细胞普通F12培养液培养就有钙结节，6孔板每孔5万细胞数接种，6天就有很多钙结节。请问各位老师战友们有遇到相同的情况吗？怎么解释呢。还做了茜素红染色与骨钙素的荧光染色，都有很强的的阳性反应' M. S  V, H5 f  L$ E. E
. s3 \! v) q- V* ]

! F6 c( f. t* z* ^/ C( f7 U6 g) y% ]4 S+ y0 B* w6 v# D

chichao0000

请问茜素红染色阳性结果是第一幅图吗？成骨诱导后的茜素红染色你做过吗，一样吗？我做的Alizarin red S染色阳性结果是类似油红那种红，和你这几幅图不一样。

light_blue

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: c5 [7 T5 G4 Q4 C/ O4 m
/ h5 H6 i# t) z& G这个是没有染色的图片，茜素红的图片是这样的：5 D5 `3 E3 _; ^; R

! i# y, [) S& T! C7 R5 j这个是40X照片。

askage

MSC确实具有自发成骨现象，我做的是脐带。一般是细胞养久了，【高密度情况下】容易发生。

light_blue

回复 askage 的帖子' b0 J4 Y# w1 W) y' D

: }8 U9 l8 C9 t( F0 P: n% j既然能自发成骨分化，地塞米松诱导也没有必要了吧，我做的诱导组成骨效果还没对照组好..

xulingous

回复 light_blue 的帖子4 p8 R6 e" z1 m2 D$ I, j

$ l: @* ?" a' |& x) |8 q. Z" F" I8 ?2 s) b原来这是钙结节啊 没有茜素红染色的时候好像就一团团的 我之前以为是细胞比较密所以扎到一堆死了。。。。

xulingous

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  R1 j; t! m! ?; h1 a
' D' r) G3 A% y! B7 d请问这个是成骨诱导多少天的？诱导体系是什么？谢谢啊~~~

xulingous

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0 H4 c. d) T4 b' i$ p; F& E2 q! ]# U; o  [, G% S
有道理·

light_blue

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0 Y7 J" d* K7 S5 [- b3 z: n/ g$ A9 U1 l! \8 @1 i/ }, D1 m7 }
以前做的21天诱导，gibco成骨诱导试剂盒。

mjc588

我之前也做过骨分化，但是和LZ这个不一样，LZ可以和文献中的图片比较一下。第一幅图片，我也觉得是细胞老化产生的团块，不知道LZ提原代细胞时是否用的幼鼠bone，根据我自己的经验，成年鼠提的BMSC只能养到P3。