请教hESC的冷冻与解冻protocal,急急急急急急

星光灿烂

我用的也是2X的冻存液，20%的hES培养基，60%的FBS，20%的DMSO。细胞低于800转离心，用hES培养基重悬，加入等体积冻存液。分装冻存管，每管的细胞量要多一点，2-3个孔的六孔板的细胞冻存一管，冻存液的体积要在1ml左右，如果冻存液体积较少的话对细胞的损伤会较大，第一天放-80度过夜，第二天移入液氮。复苏速度要快一点，融化后直接十倍稀释在离心，复苏效率还可以。

星光灿烂

我配制冻存液用的hES培养基就是平时培养时用的培养基，里面加了bFGF。