成体干细胞（AMSC BMSC HSC）的鉴定指标

Andyhigh

自己最近在看一些关于成体干细胞的一些文章，有一些疑惑，希望大家能帮我解答下。4 H3 k, u( u, `1 |) S
5 h9 t0 {" O" W
在获取ESCs或iPSCs后， 会对其做一系列的检测：多能性及分化潜能的检测，如AP染色 多能性特异性基因（定量） 多能细胞表面标记物（免疫荧光染色）Oct4和Nanog的甲基化分析  拟胚体   畸胎瘤 嵌合体···+ ~8 }: _5 ]# }1 H! T8 W
那在获取ASCs（成体干细胞，如脂肪间充质干细胞 骨髓间充质干细胞）后， 按理应该也需尽可能 进行大量的检测，已确定是否为ASCs？？？: R: H0 ?7 p7 d/ d
2 p( I" l% Q/ C- n4 ]) U1 ~
还希望各位能帮我列举下 成体干细胞的检测指标，越详细越好！！！

Andyhigh

回复 awangling 的帖子
  S3 _4 T9 m6 v7 _
* h8 [7 D2 R/ _" I+ [( p1. 取材 消化 得到初步的细胞悬液；
3 p& O6 r$ N5 s5 X( F" ?' W) [3 a! \+ Z0 g, }0 H" {
2. 用孔径为80目的尼龙网筛(250μm)过滤细胞悬液，除去未分散的组织块，收集滤液，接着用200目的尼龙网筛(80μm)，过滤掉脂肪细胞，滤液1,200rpm室温离心5min后，弃去悬液部分并用含血清的基础培养液重悬，再用400目(25μm)的尼龙网筛过滤，除去前脂肪细胞。每次过滤后要用少量培养液洗涤滤网，回收残留的脂肪干细胞，首次过尼龙网筛，事先需要用吸头吸取适量培养液压着网面吐液通透；
6 V$ T7 z* \0 \% a
/ e# `! [* {% G/ a& _6 `, j4 u0 y3. 最后需要一系列的检测才能最终确定是否为ADSCs；

awangling

请教大家去除血管和结缔组织，分离的也是脂肪细胞，顶多中间含极少量脂肪干细胞，但离称呼脂肪干细胞还太远！！; `+ m: E. m6 x9 o4 Z: u0 d9 V* M, O
大家怎么看？？？你这明显就是脂肪细胞，如何得到高纯度的干细胞？？？？发文章审稿也会问这个问题，光说胶原酶消化后得的细胞就是干细胞，不太让人信服！！请教大家
$ m# j# e4 ], |& \( V怎么回答这个问题？？

钰千

我怎么不能下载

绝对忠橙

回复 s02260441 的帖子6 ^! q) t* ], p% M4 V( ?. Q3 ]

1 X! X- V' o- L9 X1 t. y1 C这pdf是个好东西啊！

Andyhigh

回复 s02260441 的帖子5 g* Y. c) j3 ]" x1 i
* O* y* {+ a/ V) T# \  F, g
太感谢了···

s02260441

3 E0 s3 ~3 [5 {" X9 Q9 X) D

0 N/ A# X; P6 {; b: {9 y. UISCT规制的MSC基本要素，包含：5 t6 z9 n: h* @9 R. P- B
(1)显微观察, `0 f1 C# v" u* F; g
纺锤状贴附型细胞
# O3 l: w* p8 K+ E, W) [& \, `(2)表型分析
) ]1 g; h3 c$ b3 Y4 y$ c) x! mNegative: CD34 CD45 HLA-DR
2 `3 O9 f1 i3 d0 p8 yPositive: CD73 CD90 CD105
2 {" p& L' M# F0 l8 _8 f/ x+ @(3)诱导分化$ G: [7 i$ X, H; W  L
软骨丶硬骨丶脂肪; D; u7 P6 Y4 w, h; d7 q6 P* @
* g1 I( {: y6 ?. g" \8 n
Ref:

Andyhigh

回复 zjdoctor 的帖子& Q8 g3 I: b6 e  ~6 G
; v6 q4 V9 \/ e) I3 z* G' O8 t% b
好的，谢谢啊！！！

zjdoctor

回复 Andyhigh 的帖子1 c8 {* q/ a2 f9 K5 d

1 ~. s8 V) d9 L3 o& L4 @7 U3 d4 ^: R看看我的日志，参考一下。

Andyhigh

如果可以并方便的话，还请大家能提供下文献！！！  自己的课题是猪方面的 ，如果没有相关猪上的文章，小鼠和人的也可以，不过最好是近三年的！！！