脐带间充质干细胞增殖慢

xingyuncao

去年我一直用组织贴壁法养人脐带间充质干细胞，培养基是DMEM低糖+10%FBS，细胞都养的挺好的，但是最近用相同的方法，却一直养不好，传代后细胞大量死亡，细胞变得宽大，扁平，增殖很慢，不知问题出在哪，非常着急，急需各位解答，感激不尽！

benkid

学习

月_幻影

是不是消化的时间上有些过长了？而且，每个产妇的身体情况也是不一样的，所以MSC的生长情况也大不相同，我们这边有一个做的MSC，原代过后刚传了一代就老化了。。。

wf78365421

加点bFGF试试

lic126

个人建议你考虑血清原因。因为我们前段时间也出现过类似情况，细胞贴壁不好或生长缓慢，一直在找原因，后来整理资料发觉血清批次换了，尽管是同一公司，但与之前血清批次批号差别很大。后来换回以前批次附近的血清，一切恢复正常。但具体原因不明，毕竟血清成分太复杂。

piano尤尤

原代细胞的话 可能与获取的样本本身是有关系的 或许是这批样本就是不好9 C& ~! T: d# u8 ]
我养原代在初期是添加少量BFGF的 其他培养基成分一样

luyoude

细胞变得宽大，扁平，增殖很慢，那应该是细胞老化，看看有没有可能是污染了！我觉得培养基，血清，胰酶什么的影响不会这么大！

wuzhongqi

回复 xingyuncao 的帖子
/ B; M# m+ s6 r" Q- _, P! L+ J, @8 w' X/ h' n- k' d# B
1 酶消化时间太长，细胞大多都死了+ t+ _( W) O+ V+ l& D) d
2  传代密度太小，长不起来，容易分化，细胞变粗
9 G/ `3 h! U1 E5 ?3  最好是加生长因子，主要是促进细胞分裂，
2 r- V" r# x4 H9 d6 Z% ~4 该孩子的母亲是高龄孕妇，其细胞活性相当差一些，细胞容易分化

星空雾雨

回复 xuyang0317 的帖子1 D! e: H2 W) I1 y9 ~4 o
& i. z* s# ?- p5 A. s1 L( `
前辈，请问你用的什么牌子的因子  哪个厂家的 跪谢了

xuyang0317

回复 xingyuncao 的帖子) w" E( O6 d: A& k- T" j8 \0 ^
7 y4 W2 V1 V* ?0 H; |; T& {' y
没加生长因子的培养基？我试过的是不增殖，老化快，真心没有长势好的你可以多查查看看文献！