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慢病毒,腺病毒和逆转录病毒   [复制链接]

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发表于 2013-10-17 15:52 |只看该作者 |正序浏览 |打印
一直应用逆转录病毒侵染靶细胞,一直没有诱导出iPS细胞,出现了克隆,检测不是。应用脂质体转染,最近想换下病毒试试,是否慢病毒和腺病毒的侵染效率要更高,并且他们之间应该如何做选择,望大家给予帮助
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发表于 2013-10-28 14:23 |只看该作者
回复 syacr 的帖子/ p# o! B/ N. ^3 e0 k* i

" o! t9 C- N9 Linvitrogen  lipofectamine 2000 reagent
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发表于 2013-10-25 10:22 |只看该作者
个人觉得慢病毒更好,HIV反转录病毒去除了致病基因,整合到基因组内,对分裂和不分裂的细胞都有感染能力,因此干细胞也可以,我就是转染的间充质干细胞,ips也可以,选择合适的MOI,转染效率很高,传至20代仍稳定表达,如果对转染率要求高,慢病毒很多可以携带嘌呤霉素抗性基因,转染后用嘌呤霉素刷选,转染率都是90%以上。还有含标记基因GFP、LUC等等,可用于后续试验的标记。还不错。
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发表于 2013-10-25 10:11 |只看该作者
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回复 细胞海洋 的帖子( L/ D5 f" d1 m& {% j6 L

  X# {/ R2 G0 e3 R: `" o好的,谢谢提醒

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发表于 2013-10-25 10:02 |只看该作者
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发表于 2013-10-25 08:53 |只看该作者
有没有人使用过AAV病毒呀?我在思考使用腺相关病毒(AAV)是否可行
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发表于 2013-10-22 11:07 |只看该作者
慢病毒效率更高哎
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发表于 2013-10-21 16:08 |只看该作者
慢病毒不是可以直接侵染细胞吗?哪一步需要脂质体啊?
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发表于 2013-10-19 17:08 |只看该作者
转染病毒肯定是需要脂质体的,尤其是原带的细胞。个人觉得慢病毒效率是最高的,毕竟它只要整合到基因组就不会丢失,也就是说一定是一株稳定的克隆了。但是适不适合做IPS我不知道。腺病毒不会嵌合到基因组中这点来说要安全一些。
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发表于 2013-10-19 11:31 |只看该作者
回复 syacr 的帖子  a3 P2 o. g3 |: C, N) S8 v

( \6 W2 f# ?* I5 |慢病毒效率还是很高的,可以试试。腺病毒效率也不错,但是不能整合进基因组。根据你的实验目的选择吧
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