干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

 

 

搜索
朗日生物

免疫细胞治疗专区

欢迎关注干细胞微信公众号

  
查看: 31998|回复: 4
go

这是克隆吗 [复制链接]

Rank: 2

积分
204 
威望
204  
包包
80  

优秀会员

楼主
发表于 2013-11-6 14:38 |显示全部帖子
这个不是克隆,我之前做人的iPS诱导的过程中也遇到过完全一样的情况。试着挑取下来,根本不会增殖,后来发现是成纤维细胞成团出现的结果。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 5 + 15 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5  包包 + 15   查看全部评分

Rank: 2

积分
204 
威望
204  
包包
80  

优秀会员

沙发
发表于 2013-11-6 15:52 |显示全部帖子
回复 pjlsyz 的帖子0 v( T, J9 v; }. j; x( `. u: `

( U8 B0 \  N1 ?/ F, o6 u7 F6 q不是,还是重编程因子不给力。换句话说,就是重编程基本没启动,或者启动后各因子表达不平衡,比如Oct4表达低。我们之前出现这个问题是病毒包装的问题
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 6 + 15 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 6  包包 + 15   查看全部评分

Rank: 2

积分
204 
威望
204  
包包
80  

优秀会员

藤椅
发表于 2013-11-6 16:12 |显示全部帖子
回复 pjlsyz 的帖子
9 A) K- _5 B4 I0 Z9 z( C9 v" {; S9 @  d
建议你先做一个GFP的阳性质粒,先转入GFP,看看表达阳性率,还有表达的时间,这样比盲目做实验,出不出克隆靠运气的强。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 5 + 15 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5  包包 + 15   查看全部评分

Rank: 2

积分
204 
威望
204  
包包
80  

优秀会员

板凳
发表于 2013-11-7 16:47 |显示全部帖子
干细胞之家微信公众号
回复 pjlsyz 的帖子; ?8 x9 z7 G/ x# K' p8 y" k& y
- m6 O) m9 q7 W& Y
感染效率是用什么方法评估的?有多少效率?
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 1 + 5 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 1  包包 + 5   查看全部评分

Rank: 2

积分
204 
威望
204  
包包
80  

优秀会员

报纸
发表于 2013-11-8 12:46 |显示全部帖子
回复 pjlsyz 的帖子
  y' v! i: M: F5 j! H" q
! O9 y* i4 @$ P# R我们是做了一个相同质粒骨架的GFP对照质粒,然后利用293T细胞包装病毒后感染成纤维细胞,从24h开始观察细胞,计算GFP表达的比例,选出效率是100%的病毒包装组合,然后再去做iPS。因为病毒包装需要摸索滴度,比如包装质粒的添加比例也很重要,建议你再多查阅文献,把实验设计的细致一些。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 6 + 15 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 6  包包 + 15   查看全部评分

‹ 上一主题|下一主题
你需要登录后才可以回帖 登录 | 注册
验证问答 换一个

Archiver|干细胞之家 ( 吉ICP备2021004615号-3 )

GMT+8, 2025-5-7 02:36

Powered by Discuz! X1.5

© 2001-2010 Comsenz Inc.