消化MSCs时候用胰蛋白酶+EDTA,事后必须离心吗？

wen373

如果细胞比较脆弱，可以不离心，等细胞贴壁后，一定要换液。离心最好。

木木泥

我们实验室在养细胞时有人离心有人不离心，差别似乎不大，但是如果细胞背景不是很干净或是状态不是很好的时候一般会选择离心。miPS的培养手册上给的是离心而且是2次。。。供你参考吧

wangzhiqi86

离不离心也要视细胞状态、代次和类型决定的，大多数情况下不用离心，是认为对细胞没有影响。但这种影响的profiles是不是够全面呢，谁也说不清，说到底，是因为细胞对我们而言，毕竟只是一个黑箱，要想精确的弄清楚，很难。, A" z. `2 y) H- v9 x
至于EDTA的作用和对细胞影响，这个自然是要权衡利弊了，掌握好消化时间很关键，即使只有胰酶，时间长了，肯定对细胞再次贴附有影响，如果真的要弄清楚，那就需要准确做一个DOE平行实验了。

元芳

要离心。' o  T* C3 W$ _5 N/ M, V1 B$ i" B
EDTA螯合钙镁离子，进而影响细胞的黏附蛋白。