脐带间充质干细胞CD73表达率

swtarron

细胞CD73的表达率一直偏低，低的时候只有30%左右，找不到原因，不知道各位同仁养的细胞的CD73表达率怎么样啊？

avbn

回复 swtarron 的帖子3 \9 S- P- O8 [: Q
# Z7 R% c1 H- O9 A4 g
这个问题复杂了，说明你的干细胞提取方法有问题，最好说一下你的分离和扩增过程看看哪里出的问题

zhangshich

我检测的P3或P4的脐带基质干细胞，CD73表达在95%以上。应该传几代再流式检测

xiongwangyj

我最近也遇到P3比较低的，正纳闷呢！  D& t( T9 T' q1 Z  F  j; E

xiongwangyj

楼主现在还在养细胞吗？现在你的MSC的CD73表达怎么样呢？; K4 Y& [# q3 J6 I1 n; A

deshenglll

回复 swtarron 的帖子3 q, e* s) _$ j9 l# K
1 V5 _/ p) g& N6 U2 P) e
CD73很容易有波动的。我们冻的是P1代。大多数表达率在90%左右。要想一直在95%是不可能的。细胞及时的换液传代冻存就好了。

Ernest

看来都存在这个问题，CD73的表达很不稳定

wbs1986

我前阵子测了一批不同人的骨髓MSC（P4），发现CD73表达率都偏低，都是40%到80%不等，而CD90、CD105都稳定在95%以上。这两天就同一批人的MSC（培养到P9代左右）再测了一下，发现CD73表达率更低了，20-30%，CD73是否跟代数相关，但有文献报道传代到10几代都有90%以上的表达率。

fenglei@sc-l.co

1.细胞培养传代时细胞培养瓶不可以重复使用；
  V& u7 Q3 i: \& ~9 i2.细胞最好多传几代，我们检测一般在P3以后；3 m7 s5 ]% y* d; o: F
3.流式检测是一定要先做对照，这个是必须的；
# N0 U- K8 b4 [, p" `( A: i. t4.抗体按照说明书使用，不要随意更改使用量；
6 q% `& v" W: R9 `& i. x. r5.上样前离心6 j' X( j3 B5 |$ U2 I, h/ e
6.更换抗体，做一下对照。现在抗体投诉很多的。- ?+ p( y- h8 \8 R

lipd09@mails

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& a3 B; U" \2 `4 |有些时候，胰酶的消化也会对干细胞表面maker的表达率也会有影响。