脐血干细胞、脐带间充质干细胞、脂肪间充质干细胞和CIK细胞冻存密度

tianangelt

大家好，最近在冻存以上四种细胞，但冻存效果不好。请问大家在冻存以上四种细胞的时候，冻存密度分别是多少呢？谢谢。

tianangelt

我冻存以上细胞都是用的Medium：FBS：DMSO=5:4:1的冻存液，另外都是人源细胞，希望大家不吝赐教

tianangelt

回复 wf78365421 的帖子
2 G+ K5 G$ N. H/ \
; }3 W4 k% J  `' P8 G如果达到1*10^8/ml是不是就太高了？

tianangelt

回复 yaolinzhang 的帖子
5 M5 P, Z5 V* |9 T% `7 X  h# e+ @  Y. ?3 {" n$ V, A
这个密度会不会太低了？复苏的时候本来就会丢失一部分细胞，这个密度如果复苏在T75培养瓶的话，需要很多支合并在一起吧？请问您用这个密度冻存的是MNC细胞吗？

tianangelt

回复 apsuifeng 的帖子8 o! i8 _$ w, j: Q- }" D& y5 D
# B7 W2 {6 ]& ^9 v, U, Y: t1 ?
个人感觉应该不会，很多人用的是FBS：DMSO=9:1的冻存液，只是不知道密度太高是不是会影响冻存效果。

tianangelt

回复 2420527 的帖子
$ Z" {* ~( n  T* O. p( m
& q9 Z2 M$ G0 @1 S% t  u, c那您有没有试过比较高的浓度呢？如果达到10^8/ml可以吗？我怎么看有的人说MNC冻存要达到2*10^8呢，没有查到相关的文献报道。

tianangelt

回复 yangpan521 的帖子2 S3 B; s) W( l: J- Z( p

1 G# d5 w# \9 ~$ D+ r冻存淋巴细胞必须用HSA吗？可以用human plasma代替吗？

tianangelt

回复 yangpan521 的帖子
6 C, C* m2 r. R  ]% k5 F% j+ y( y, y  Z& k/ a9 z* e2 t& ^/ F
我们的血浆灭活30min，但冻存效果不好，而且会损失很多细胞。请问您做淋巴细胞冻存时，复苏后细胞活力能达到多少？死细胞和损失的细胞多吗？谢谢。

tianangelt

回复 2420527 的帖子( x% Y3 o3 b$ `* j" b. S& l) D
8 i' b4 g% V# e$ w; e+ p- E  X$ R
细胞是会成团，一般MSC冻存密度比较低，MNC有时会达到10^8，以后试一下降低密度看看。

tianangelt

回复 deshenglll 的帖子& H& `4 c+ z3 q: Z4 R

1 Z( v( @$ {- c/ `* n2 D多谢，FBS高了会有不好的影响吗？