求助：各位老师请指导：貌似IPS细胞培养过程中分化了

922922922

各位老师好，我的IPS细胞培养7天之后，感觉克隆的边缘不平滑了，开始出现不规则的形状，不再像原来的圆形。请问是IPS分化了吗？如果是，应该怎样剔除这些分化的细胞呢？请各位老师和师兄师姐不吝赐教！先谢过了

细胞海洋

建议上图

lipenix

机械法挑克隆传代，对细胞的损伤较小；或者IV胶原酶消化，时间短一点，分化的部分不会被消化下来。

zm19900508

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& r; {7 I( C& r3 M
1 {+ N5 ]% b6 W) q5 ZiPSCs 很容易分化的，是在2i里养的吗？

木木泥

如果有分化倾向的话不妨尽快传代  改善下生长状态。那些已分化的不能在传代后的干细胞培养基里生长 未分化的能在形成克隆

穿裙子的猫

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9 T: N3 l% Q" W回复 木木泥 的帖子
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我的好像也分化了，但是这些貌似分化的细胞可以在干细胞培养基里生长啊！4 l* Y' S0 C. [! k# j$ n# I2 S/ p
搞不懂了？过几天之后，这些圆形的细胞中间就会开始形成细小颗粒的细胞，立体生长。, }# O& K- N7 Q7 W$ ~" K
我想知道我这是不是干细胞啊？

穿裙子的猫

回复 zm19900508 的帖子- n. Y+ G. X. J" d$ d
- E" z8 `! ^- F2 `% x0 D  r
我的一直都是在干细胞培养基中培养的，现在开始变黑，边缘有相对比较大的细胞了。你是怎么办的？

Emma1986

显微操作去掉边缘，保留正常形态的中心部分，继续传代挑选。

yiyi8909

边缘清晰明亮的先用记号笔标出拿枪析出

922922922

回复 yiyi8909 的帖子/ Z+ ?0 P: u, d1 s; m
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我们是在倒置显微镜下做的。请问您，是不是在培养皿的底部用记号笔标出，然后是在镜下还是不用在镜下，就可以用枪洗出来？ 期待您的回复,谢谢！