发一个造血功能重建实验的方案，请指正！

ciweiyuan

细胞移植前的24小时，用325 cGy 半致死剂量处理8到10周大的小鼠，同时腹腔内注射CD122抗体（ 1 mg ⁄ mouse
% d4 m& S! s- k0 Y），把造血干细胞通过静脉注射的方式打到小鼠体内，移植6到8周后，处死小鼠进行造血功能重建的分析。

ccwei0615

My protocol is 800 Rad for Balb/C or 950 Rad for C57Bl6 24 hrs before the BM cells injection.  (3x10^6 cell >>100% survival after 8 weeks, 1x10^6 cell>>~50% survival after 8 weeks)
# o0 j. U$ L# I0 x7 L/ z. W5 yI was told that just 1 HSC is good to reconstitute blood system. But I don't know how do you define your HSC.  l7 T" u( A5 \+ e' }
But if you inject BM cells as I do, you will see GvHD symptom.

ciweiyuan

回复 chutu 的帖子4 m: b( g- x8 I+ O" J' \

5 D. d7 B5 D# q8 H  t# e& X* B% @0 Y. i谢谢大牛的回答，请问你知道上海哪里有做造血重建研究的呢

chutu

人家现在做人的造血干细胞移植已经不用NOD/SCID小鼠了，因为这种小鼠的NK细胞还保留一定活性，对移植物仍然有排斥，所以需要给予抗NK细胞的抗体来提高移植率。现在有了免疫缺陷程度更高的小鼠NSG，国内也出现了类似的小鼠。

ciweiyuan

求问上海这边有哪些实验室能够做造血重建研究呢

ciweiyuan

回复 crazytime 的帖子
. m, k! N! S2 n' j4 I( g. t9 u6 {( @+ Q" {! H$ e
嗯。看下来好像基础培养基和pbs都可以的，谢谢回复

crazytime

回复 ciweiyuan 的帖子. m, y" V3 ]+ b' V. U0 D

/ j) C) m* f. H我觉得既然是注射，那么对照用生理盐水好点吧？

goblinwang

1--5X10^5/mouse

ciweiyuan

回复 goblinwang 的帖子+ z( B3 @% X* E# ?

1 s1 I- T+ e  [$ [' _存活率低是否和辐照的剂量有关？，你一般移植多少细胞量呢

goblinwang

9 J) K9 p; }9 t0 v' o( Y; q

5 c, L* Y! W4 c) Z$ b对照应该是用不加因子，不加血清，不加双抗的基础培养基，比如我用的IMDM，移植的时间选择，我觉得辐照4-6小时内进行，比较好，至于腹腔注射抗体抑制免疫排斥，我没怎么注意，致死剂量照射，免疫系统基本都缺失了，不过我移植实验最后存活率只有50%多点，不知道其他细节是不是产生了影响，如果你有好点的意见和方法可以共同探讨，