CIK细胞污染

lyj-0017

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4 k7 O. K; c; s6 z5 b; Q: Z7 H' }9 D" W) Y: ]( C( A' ?7 `! ~7 ^
不清楚灭活能不能消除黑胶虫。
5 Z5 _( ~, r7 X# M" t3 _. B: l8 e/ {另外，能否大体介绍一下你是如何制备外周血单个核细胞的？前期处理也不能排除

cjq12862

除了楼上各位同行的推测，还有一个可能性：寄生虫污染，建议楼主立即找出污染源，环境消毒后重新培养。

ciweiyuan

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4 }$ z. ^! f7 D/ w% a0 D
9 _5 b1 u' \$ `/ n3 M' |" p- _不客气，期望你实验顺利

mtdj1314

回复 ciweiyuan 的帖子1 D2 d( {6 c4 a9 p; i  b) X
+ D7 w, \- c7 d, [( n$ W" F, K
确实是比较棘手的事情呢，谢谢你宝贵的经验

mtdj1314

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" y% q) e; {6 l1 w, i) R  A: x7 V# F, e, O5 P+ i( q
是的，平板培养的。自体血浆灭活的话能消除黑胶虫吗？

lyj-0017

回复 mtdj1314 的帖子, z% b, e; b( B, G( U  U. `) z

- u' k( K" B% K1、你说的培养液经18小时培养是在平板中培养的吗？4 ~5 Y1 H% g) x0 F  A
2、我们以前也遇到过黑胶虫，当时我们的老实验技师也说没有什么好的办法，现在也不知道有什么好办法。) {& z$ i6 R& }5 ~# i3 Y
3、既然用的自体血浆，为何不灭活补体呢？大家通用的方法你们为何不去做呢？再说也不麻烦啊。7 h5 c! `! u4 ^0 x4 p  x" ~2 u
4、人体自身携带黑胶虫这个还真不清楚，但是黑胶虫这个问题貌似也没有一个确切的说法说明其到底是什么。

mtdj1314

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  i& K1 ?1 X3 r! M' m7 v( y6 F8 z/ w" A% B6 _) _
接种后24h观察，培养液轻轻晃动有一层细沙状物质，怀疑是细菌污染，但是为何培养液经18h培养后却没看到菌落？黑胶虫该如何去除呢？我使用的是自体血浆，只是没有经过56°C灭活补体，人体自身会携带黑胶虫吗？

ciweiyuan

据说什么黑胶虫也好胶原虫一旦发现污染很难很好的去除，我以前有碰到过类似这种的就开始清理消毒灭菌实验室培养箱，我真没有好的办法，不知道其他牛人有没有什么好的方法

mtdj1314

回复 ciweiyuan 的帖子5 K0 o$ i1 S, i: Q% p, d3 O
  b$ i) y6 _) E1 a$ D
我用的是自体血浆，没有使用动物血清，那是否说明自体血浆里面存在胶原虫？这个虫子有什么特点？如何鉴定和去除呢？

lyj-0017

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/ \0 O* J( j) m4 a; n% E
9 A4 q; T, f- U* a$ h- ?8 P        24小时内细胞悬液没有变浑浊，一般可以排除细菌污染；霉菌污染的话48小时应该可以观察到；至于支原体污染，常规手段很难监测到。血小板是终末分化细胞，一般无法增殖，在72h之内应该都是可以自行裂解掉的。
: V) M4 u! Q( D1 W" L       你应该是在培养开始时加入胎牛血清了吧？有些动物血清中就会含有一种所谓的“黑胶虫”，这不是个人的问题！你完全可以使用无血清培养基进行培养。