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CIK细胞污染   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2013-12-12 10:30 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
       我最近开始养CIK细胞,两次培养都在接种第二天后发现杆状物存在,能够运动,仔细观察发现其实是扁平椭圆状,侧面为杆状,怀疑是细菌污染,但是48小时培养液颜色依旧没有明显改变,取24小时培养液进行细菌培养,目前已经18h,还没有肉眼可见菌落,不知道是否为细菌污染?是什么污染?还有血小板在培养液中是什么形态?体外能否增殖?请各位大侠解答疑惑。, u, @& D& A3 w5 r$ \' O
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沙发
发表于 2013-12-12 10:38 |只看该作者
我也遇到了同样的问题,求解

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藤椅
发表于 2013-12-12 10:41 |只看该作者
是不是大家一直提到的黑胶虫污染?显微镜下仔细看看,是不是都还在运动的?
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板凳
发表于 2013-12-12 10:56 |只看该作者
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回复 各输己键 的帖子' h; T8 ~) C7 n& g$ i$ C- T& o8 s

% O1 B/ x$ ]4 u1 H9 r3 J是可以运动的,请问黑胶虫污染怎么检测呢?一般来源是标本还是操作?
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报纸
发表于 2013-12-12 11:40 |只看该作者
能判断出是黑胶除污染吗?我也出现了这个问题,不过现在细胞貌似长起来了
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地板
发表于 2013-12-12 12:35 |只看该作者
应该是血清里带的胶原虫吧,把血清过滤会好点
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发表于 2013-12-12 12:41 |只看该作者
血小板形状不规则,一般呈圆形,比红细胞和白细胞小得多,无细胞核,有质膜,是由巨核细胞破裂而成的所以它应该是不能增殖的。
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发表于 2013-12-12 15:01 |只看该作者
回复 mtdj1314 的帖子8 t8 t6 s. t) y
- n* T" J) @- R3 H4 @$ C) ^
        24小时内细胞悬液没有变浑浊,一般可以排除细菌污染;霉菌污染的话48小时应该可以观察到;至于支原体污染,常规手段很难监测到。血小板是终末分化细胞,一般无法增殖,在72h之内应该都是可以自行裂解掉的。
* D3 ~* Q3 ~. e. U2 D       你应该是在培养开始时加入胎牛血清了吧?有些动物血清中就会含有一种所谓的“黑胶虫”,这不是个人的问题!你完全可以使用无血清培养基进行培养。
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发表于 2013-12-12 15:09 |只看该作者
回复 ciweiyuan 的帖子
' Q4 P4 y- |: X6 _4 F* a5 z3 n- }2 V- Z8 N% U# [) n
我用的是自体血浆,没有使用动物血清,那是否说明自体血浆里面存在胶原虫?这个虫子有什么特点?如何鉴定和去除呢?
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发表于 2013-12-12 15:14 |只看该作者
据说什么黑胶虫也好胶原虫一旦发现污染很难很好的去除,我以前有碰到过类似这种的就开始清理消毒灭菌实验室培养箱,我真没有好的办法,不知道其他牛人有没有什么好的方法
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