CIK细胞污染

mtdj1314

回复 lyj-0017 的帖子) f( e$ B, c; M0 P

6 E. P7 s; w3 O! F9 b. V接种后24h观察，培养液轻轻晃动有一层细沙状物质，怀疑是细菌污染，但是为何培养液经18h培养后却没看到菌落？黑胶虫该如何去除呢？我使用的是自体血浆，只是没有经过56°C灭活补体，人体自身会携带黑胶虫吗？

lyj-0017

回复 mtdj1314 的帖子. ~1 |) G6 g' K% L3 Z% @
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1、你说的培养液经18小时培养是在平板中培养的吗？; e$ n8 l, K& H! V( \' O! r
2、我们以前也遇到过黑胶虫，当时我们的老实验技师也说没有什么好的办法，现在也不知道有什么好办法。1 A5 k. P: a# T# c0 d7 m+ M! `
3、既然用的自体血浆，为何不灭活补体呢？大家通用的方法你们为何不去做呢？再说也不麻烦啊。( q; K) p) a' h0 K, ?$ L  m* B1 t
4、人体自身携带黑胶虫这个还真不清楚，但是黑胶虫这个问题貌似也没有一个确切的说法说明其到底是什么。

mtdj1314

回复 lyj-0017 的帖子, E  D9 a( h. s: n% W1 l
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是的，平板培养的。自体血浆灭活的话能消除黑胶虫吗？

mtdj1314

回复 ciweiyuan 的帖子6 u% }6 B. @4 A6 ]2 c
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确实是比较棘手的事情呢，谢谢你宝贵的经验

ciweiyuan

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不客气，期望你实验顺利

cjq12862

除了楼上各位同行的推测，还有一个可能性：寄生虫污染，建议楼主立即找出污染源，环境消毒后重新培养。

lyj-0017

回复 mtdj1314 的帖子4 O$ s* |7 D% d/ u
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不清楚灭活能不能消除黑胶虫。
/ Z) K2 a/ W. k8 ~9 t另外，能否大体介绍一下你是如何制备外周血单个核细胞的？前期处理也不能排除

mtdj1314

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3 l# k1 j5 [+ t寄生虫污染？可是两个标本是不同个体来源的呀

mtdj1314

回复 lyj-0017 的帖子. g0 h% ?  L8 L7 Z# t
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前期处理采用PBS稀释血液，淋巴细胞分离液分离单个核细胞，然后再PBS清洗2遍，接种入培养瓶，应该是没有问题的呢

future007

做CIK治疗不是一般都需要第7天的时候送检验科做细菌培养和其他污染源检测嘛