CIK细胞污染

mtdj1314

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) X* ^# H) ]6 \# D- i0 {/ j接种后24h观察，培养液轻轻晃动有一层细沙状物质，怀疑是细菌污染，但是为何培养液经18h培养后却没看到菌落？黑胶虫该如何去除呢？我使用的是自体血浆，只是没有经过56°C灭活补体，人体自身会携带黑胶虫吗？

lyj-0017

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& L" j( ^0 @2 l( K: S1、你说的培养液经18小时培养是在平板中培养的吗？
( Y6 }" n8 [2 L: c2、我们以前也遇到过黑胶虫，当时我们的老实验技师也说没有什么好的办法，现在也不知道有什么好办法。
0 ~  `8 C+ \& x, f/ n/ \7 d3、既然用的自体血浆，为何不灭活补体呢？大家通用的方法你们为何不去做呢？再说也不麻烦啊。  v, M1 Q1 ~# `' s
4、人体自身携带黑胶虫这个还真不清楚，但是黑胶虫这个问题貌似也没有一个确切的说法说明其到底是什么。

mtdj1314

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是的，平板培养的。自体血浆灭活的话能消除黑胶虫吗？

mtdj1314

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, |& F4 `) r. c: F! m. G4 y4 z) E1 h, K/ W& t3 e* N- H" |
确实是比较棘手的事情呢，谢谢你宝贵的经验

ciweiyuan

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+ z3 Q& S& p. M8 x* {' T  A) F7 l. E% W# \6 T4 x9 I
不客气，期望你实验顺利

cjq12862

除了楼上各位同行的推测，还有一个可能性：寄生虫污染，建议楼主立即找出污染源，环境消毒后重新培养。

lyj-0017

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* N% @# S3 ]! n9 `0 X5 h; z+ s& x" A  P5 j3 R+ W9 A
不清楚灭活能不能消除黑胶虫。3 Z; n3 O5 [) F5 E6 Z0 g
另外，能否大体介绍一下你是如何制备外周血单个核细胞的？前期处理也不能排除

mtdj1314

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8 M9 z4 F0 F3 d9 A5 z# E# z: H( y  C% n/ ~
寄生虫污染？可是两个标本是不同个体来源的呀

mtdj1314

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- l6 z/ X; t3 l' c7 V/ L  M# L
$ Y4 l, Z2 r1 l2 L( D0 Y前期处理采用PBS稀释血液，淋巴细胞分离液分离单个核细胞，然后再PBS清洗2遍，接种入培养瓶，应该是没有问题的呢

future007

做CIK治疗不是一般都需要第7天的时候送检验科做细菌培养和其他污染源检测嘛