人脐带植块培养清洗换液的问题

willow0711

在做脐带植块培养时，细胞爬出时间多数的是人家传代的时间，时间长的要2-3周多，不知道是什么原因。想问下各位大侠：3 B6 ?- g$ z& }% Y- ~
1、脐带剥除脐动静脉和外表皮，得到的华氏通胶，是不是要把其多洗几遍，不那么粘稠了细胞才容易往外爬？6 a& q3 j# D; g. k: I
2、植块贴壁后，是半量换液还是全量换液更利于间充干细胞爬出呢？% O5 Z# Z1 {6 t+ ~- G8 e. {. X: ]/ m+ E, C
谢谢！

zhusealin

贴壁后半量换液

mtdj1314

以我的经验，
4 T" i& z7 I4 A1、剥离脐带时候，得到的华通氏胶不需要再清洗
, u0 K- [( |4 S: o( z2、在3-4天补充液体，7天半量换液比较有利于细胞爬出。

willow0711

回复 zhusealin 的帖子3 G3 y. o  N4 v7 K. j

& G9 t4 ?, p* H* N5 {! j哦，谢谢

willow0711

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2 q  ^+ E9 u! D; L, j  H/ t  V3 U2 f" ]! O  |1 L
哦，谢谢

willow0711

mtdj1314 发表于 2013-12-18 10:33
+ p/ [# D' f" g9 b* O以我的经验，+ G* |0 e4 }4 ?3 D* n& p3 _6 r
1、剥离脐带时候，得到的华通氏胶不需要再清洗
7 T+ H. S" ~6 M1 o- d" J2、在3-4天补充液体，7天半量换液比较有利于 ...

+ \- I6 k' A. [# d+ z那你的方法，一般什么时候细胞爬出？多久传代呢

单个核细胞

! \! ]5 X  J/ @/ Y7 s+ _
7 S/ T( F9 N( S+ |& b7 ?回复 willow0711 的帖子1 G$ U. E6 B- J% w" v  |* }
6 h" S1 \' v% E4 J8 E
1.不需要特意洗涤，洗涤后水分较大，反而不利于组织块贴壁；
( E% |* I/ x! O8 E. w2.细胞能不能爬出来，个人认为跟你有没有洗涤没有多少关系；0 P, V- n& H# p, q
3.组织块贴壁3-5小时后，可直接加入完全培养液，放置9-10天后观察，可见少量细胞沿组织块周围爬出，这时候可去除组织块，全量更换新鲜完全培养液，再放置3天左右，首次传代即可。% P" o, B. F/ I

6 ~  L" P* x" V) Z8 ?& f5 @3 S附图如下（点击图片可放大）：
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willow0711

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& U; h) |. k' D  v; d' F5 y
5 }+ [1 {1 {/ T% D( E哦

willow0711

单个核细胞 发表于 2013-12-18 11:50 ( g6 r0 d$ q$ Z, ~/ l" k+ ?+ k
回复 willow0711 的帖子/ m8 @& C6 m( x: |: a' M
7 R  s$ e3 e3 z" H# I6 z$ u
1.不需要特意洗涤，洗涤后水分较大，反而不利于组织块贴壁；

& V) h  |+ U' V- p9 |9 u5 L9-10天中间都不换液吗

zhangshich

有时候细胞就在组织块的底下，组织块脱落有部分细胞贴在板底。其实换液都没有一定，关键是不要让组织块漂浮起来。