人脐带植块培养清洗换液的问题

willow0711

在做脐带植块培养时，细胞爬出时间多数的是人家传代的时间，时间长的要2-3周多，不知道是什么原因。想问下各位大侠：
  [: D8 L# ?' v- S- f$ c1 ^  `1、脐带剥除脐动静脉和外表皮，得到的华氏通胶，是不是要把其多洗几遍，不那么粘稠了细胞才容易往外爬？
* r4 c1 U6 ?/ P+ D- C2、植块贴壁后，是半量换液还是全量换液更利于间充干细胞爬出呢？
3 h' D7 a; B4 O谢谢！

zhusealin

贴壁后半量换液

mtdj1314

以我的经验，" G0 [, x+ P& R, k
1、剥离脐带时候，得到的华通氏胶不需要再清洗2 e" u$ ]2 V* s2 L! z. ]4 o/ l
2、在3-4天补充液体，7天半量换液比较有利于细胞爬出。

willow0711

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# d/ _. G! W# i/ c: z7 @
哦，谢谢

willow0711

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; X+ t. R' g: Z0 w: y, F. F0 P4 L/ ]* m" M4 F
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willow0711

mtdj1314 发表于 2013-12-18 10:33
7 P1 j/ w- C: \以我的经验，8 Y" {8 s7 N; B# ?8 y1 q/ ~3 R
1、剥离脐带时候，得到的华通氏胶不需要再清洗: k  Q. s2 Z2 J; x8 L( O# ~- a
2、在3-4天补充液体，7天半量换液比较有利于 ...

9 @. @8 }) j/ o! ^
那你的方法，一般什么时候细胞爬出？多久传代呢

单个核细胞

& R/ G' V" q; S% P5 u4 s+ v9 x9 n6 z9 K, U) e
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" c$ N1 g) Z8 }. a4 g0 l2 I& R
+ C% p0 Y) w+ ~# h+ w& ?1.不需要特意洗涤，洗涤后水分较大，反而不利于组织块贴壁；6 _1 z# m7 M; H3 Z, w0 R  S
2.细胞能不能爬出来，个人认为跟你有没有洗涤没有多少关系；
9 b( @& _6 `$ _3.组织块贴壁3-5小时后，可直接加入完全培养液，放置9-10天后观察，可见少量细胞沿组织块周围爬出，这时候可去除组织块，全量更换新鲜完全培养液，再放置3天左右，首次传代即可。
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: J0 `! J' Z! q% b0 b$ z6 i( H1 G附图如下（点击图片可放大）：
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willow0711

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9 F; h. l! G3 {" `; e1 N3 i' `  q' ]' I
哦

willow0711

单个核细胞 发表于 2013-12-18 11:50
& l. v& T; t9 G% x2 N. g- l( ]$ C回复 willow0711 的帖子
, M$ ~* q# P7 G' T6 ~# @- y
" R. \# z8 a: L: W% n/ }1.不需要特意洗涤，洗涤后水分较大，反而不利于组织块贴壁；

2 e- C- K5 W+ }  h9-10天中间都不换液吗

zhangshich

有时候细胞就在组织块的底下，组织块脱落有部分细胞贴在板底。其实换液都没有一定，关键是不要让组织块漂浮起来。