人脐带植块培养清洗换液的问题

willow0711

在做脐带植块培养时，细胞爬出时间多数的是人家传代的时间，时间长的要2-3周多，不知道是什么原因。想问下各位大侠：8 j0 n  G& }) K0 n* A
1、脐带剥除脐动静脉和外表皮，得到的华氏通胶，是不是要把其多洗几遍，不那么粘稠了细胞才容易往外爬？
, u$ r0 ~/ j' p" j2、植块贴壁后，是半量换液还是全量换液更利于间充干细胞爬出呢？
8 D" Q& N  d* F2 I- H  ^8 D! p' F谢谢！

zhusealin

贴壁后半量换液

mtdj1314

以我的经验，
  O! }. q+ ?! v% S- z' [1、剥离脐带时候，得到的华通氏胶不需要再清洗$ ]- `1 ?( s: [7 s7 H) E
2、在3-4天补充液体，7天半量换液比较有利于细胞爬出。

willow0711

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/ H( y+ X, {1 K0 u8 ~& `9 N( W- ]/ E+ T1 _
哦，谢谢

willow0711

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$ c$ v$ B7 V6 f" ~$ @9 A, x! s& x9 A! H/ m; [8 `, s$ p0 A7 ^5 E
哦，谢谢

willow0711

mtdj1314 发表于 2013-12-18 10:33
" a+ g0 I5 q4 u5 v" T( i以我的经验，
/ v1 h. R5 v- l" A+ I2 u. B1、剥离脐带时候，得到的华通氏胶不需要再清洗
  O' X1 O1 f# Y. F2、在3-4天补充液体，7天半量换液比较有利于 ...

4 q) o. b3 l% P1 A: D. J那你的方法，一般什么时候细胞爬出？多久传代呢

单个核细胞

# g% T: d7 b0 l. K8 ~5 p( i! h2 F* Y4 G
回复 willow0711 的帖子8 ]. p7 d& x" a1 Q, u: Z% J

' ^6 C. D$ l' _! C/ O1.不需要特意洗涤，洗涤后水分较大，反而不利于组织块贴壁；
4 g- [/ j* f8 `2.细胞能不能爬出来，个人认为跟你有没有洗涤没有多少关系；& e) y3 N% \6 v; O) ^4 X
3.组织块贴壁3-5小时后，可直接加入完全培养液，放置9-10天后观察，可见少量细胞沿组织块周围爬出，这时候可去除组织块，全量更换新鲜完全培养液，再放置3天左右，首次传代即可。% u+ Y& V5 i3 s& {8 y* p
1 k! ]9 B+ }1 t/ }
附图如下（点击图片可放大）：2 J1 j% K+ D6 y0 r1 ^6 [- o

3 m6 h6 D& T- F' j- q4 w

willow0711

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- O" G! ?! s5 X2 ~9 X: g
哦

willow0711

单个核细胞 发表于 2013-12-18 11:50 ( S2 \/ Y0 h8 O
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- G) H" U/ O0 Y, q1.不需要特意洗涤，洗涤后水分较大，反而不利于组织块贴壁；

0 m3 ^9 T! V# L
9-10天中间都不换液吗

zhangshich

有时候细胞就在组织块的底下，组织块脱落有部分细胞贴在板底。其实换液都没有一定，关键是不要让组织块漂浮起来。