人脐带植块培养清洗换液的问题

willow0711

在做脐带植块培养时，细胞爬出时间多数的是人家传代的时间，时间长的要2-3周多，不知道是什么原因。想问下各位大侠：- H, F" c/ I* e  E0 A' \, I6 `8 `- a
1、脐带剥除脐动静脉和外表皮，得到的华氏通胶，是不是要把其多洗几遍，不那么粘稠了细胞才容易往外爬？5 x0 O2 J, [4 Q" r# ^% t% }( d
2、植块贴壁后，是半量换液还是全量换液更利于间充干细胞爬出呢？
1 g8 R$ y# x# }. }% ]: s谢谢！

zhusealin

贴壁后半量换液

mtdj1314

以我的经验，
8 P9 C% j3 r# |5 d$ ]4 q' w1、剥离脐带时候，得到的华通氏胶不需要再清洗. x  |) q" T( P: u$ N' n
2、在3-4天补充液体，7天半量换液比较有利于细胞爬出。

willow0711

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  z7 S% [4 ?* @6 b2 G; g8 A哦，谢谢

willow0711

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; I" S: e8 ~% e5 W哦，谢谢

willow0711

mtdj1314 发表于 2013-12-18 10:33
$ a5 T+ f8 _+ \/ ?6 {以我的经验，
3 F2 V7 P! _* _1、剥离脐带时候，得到的华通氏胶不需要再清洗6 r& j$ J+ w! x
2、在3-4天补充液体，7天半量换液比较有利于 ...

3 ?1 P2 d8 y$ K
那你的方法，一般什么时候细胞爬出？多久传代呢

单个核细胞

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回复 willow0711 的帖子; R, J$ B0 I2 s
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1.不需要特意洗涤，洗涤后水分较大，反而不利于组织块贴壁；
7 E  {* d5 G+ Z+ S+ B2 e2 g( q2.细胞能不能爬出来，个人认为跟你有没有洗涤没有多少关系；
) \+ ?5 C# K2 q7 E- ?" }' a& \3.组织块贴壁3-5小时后，可直接加入完全培养液，放置9-10天后观察，可见少量细胞沿组织块周围爬出，这时候可去除组织块，全量更换新鲜完全培养液，再放置3天左右，首次传代即可。! C* J/ q* N1 i4 a2 K/ T: L
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附图如下（点击图片可放大）：
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willow0711

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9 z* z! g% e, v. U! k; M哦

willow0711

单个核细胞 发表于 2013-12-18 11:50 - L: y' n) |# q
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+ C0 a3 M+ j0 }+ r) U! q4 `1.不需要特意洗涤，洗涤后水分较大，反而不利于组织块贴壁；

, T- R. @+ x4 S1 [9-10天中间都不换液吗

zhangshich

有时候细胞就在组织块的底下，组织块脱落有部分细胞贴在板底。其实换液都没有一定，关键是不要让组织块漂浮起来。