人脐带植块培养清洗换液的问题

willow0711

在做脐带植块培养时，细胞爬出时间多数的是人家传代的时间，时间长的要2-3周多，不知道是什么原因。想问下各位大侠：( F6 b' p7 R4 g9 [
1、脐带剥除脐动静脉和外表皮，得到的华氏通胶，是不是要把其多洗几遍，不那么粘稠了细胞才容易往外爬？
( i! e+ B1 F  t' u2 u- A2、植块贴壁后，是半量换液还是全量换液更利于间充干细胞爬出呢？
* K% w+ w) v# y- m3 {$ h# n  g! n: b谢谢！

zhusealin

贴壁后半量换液

mtdj1314

以我的经验，: U) X! L7 r1 F
1、剥离脐带时候，得到的华通氏胶不需要再清洗# B( g1 O% L5 z/ T% U
2、在3-4天补充液体，7天半量换液比较有利于细胞爬出。

willow0711

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" _5 M5 Z  X- F3 c# ?* b( l
哦，谢谢

willow0711

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; w, y' c" ~! @0 |, w8 W$ r* p8 k4 I7 Q0 i1 z
哦，谢谢

willow0711

mtdj1314 发表于 2013-12-18 10:33 2 N3 w+ P6 m9 }) m6 W
以我的经验，
+ {( b5 K8 a' h! ~1、剥离脐带时候，得到的华通氏胶不需要再清洗! b$ _$ Y/ R6 u
2、在3-4天补充液体，7天半量换液比较有利于 ...

2 `3 w8 P% Z3 ?
那你的方法，一般什么时候细胞爬出？多久传代呢

单个核细胞

& j4 f& B& z) w, U* ^
6 U) ~  G4 m" K' R4 H& s. G回复 willow0711 的帖子
6 |6 Z+ R2 ^  ~  C
0 [7 @% T/ {* E8 x7 q2 {% d' o1.不需要特意洗涤，洗涤后水分较大，反而不利于组织块贴壁；$ f( ]# ?0 u+ g, l6 O, l3 N9 o
2.细胞能不能爬出来，个人认为跟你有没有洗涤没有多少关系；4 W5 v6 G3 L4 T
3.组织块贴壁3-5小时后，可直接加入完全培养液，放置9-10天后观察，可见少量细胞沿组织块周围爬出，这时候可去除组织块，全量更换新鲜完全培养液，再放置3天左右，首次传代即可。
  o0 e  R' N) k8 D5 w/ W3 H0 a: Z
附图如下（点击图片可放大）：
4 N% p0 p( o3 a, J) Q) V! a# U* i" Y7 x- T8 q+ a9 r( F, V7 k0 d, @

willow0711

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6 v+ M9 ~; y! ^! K
哦

willow0711

单个核细胞 发表于 2013-12-18 11:50
  O: E: a% R6 A8 M3 ~, p! E回复 willow0711 的帖子/ W0 K- \! L8 U" c7 K

$ y& E( X% s' c. E1 J1.不需要特意洗涤，洗涤后水分较大，反而不利于组织块贴壁；

' e3 T: N+ F6 n2 i0 j- u- w9-10天中间都不换液吗

zhangshich

有时候细胞就在组织块的底下，组织块脱落有部分细胞贴在板底。其实换液都没有一定，关键是不要让组织块漂浮起来。