人脐带植块培养清洗换液的问题

单个核细胞

; U* q$ @9 e9 j6 a" p$ l" n

6 K6 w/ ]/ w2 N8 M2 V5 s回复 willow0711 的帖子. r: z5 O+ A# g: S( Q  }

) X. \1 h% B. ]7 x" j+ a1.不需要特意洗涤，洗涤后水分较大，反而不利于组织块贴壁；
. z" @! S4 A) K' X, ~/ u; d) s2.细胞能不能爬出来，个人认为跟你有没有洗涤没有多少关系；
' s/ w3 A( j9 O! b3.组织块贴壁3-5小时后，可直接加入完全培养液，放置9-10天后观察，可见少量细胞沿组织块周围爬出，这时候可去除组织块，全量更换新鲜完全培养液，再放置3天左右，首次传代即可。
2 ^( i- M3 _9 [) Q4 V) c, U) l* ~# ?% m0 a* @
附图如下（点击图片可放大）：
7 Q' N# D8 ?8 P; U3 ]5 m- {
4 `! Y. N$ H3 x% g- m9 J5 [

单个核细胞

回复 luyue6453 的帖子
. a. s1 h' U  y, K4 s9 i4 c9 T" j- A- |2 h
从统计来看，没有添加任何细胞因子的状态下，15天左右可以长到如第3个图片（即大部分贴贴组织块周围局部细胞成致密状，第3个图片中的组织快已经脱落），可以进行传代培养。若是添加相关细胞因子，应该可以更快吧！7 D7 x) l; N, |8 Z: d' o; _

9 |' ?4 s- ^. ^完全培养液为90% DMEM/F12（1:1）+10% FBS，均为市售商品化培养基，可以参考Gibco或者Hyclone的官网。

单个核细胞

回复 zhoufan025 的帖子
, K; N4 ?2 @! `/ B
* R0 d2 m' s: {; k: g原代培养的时候可以不着急去组织块，到首次传代时才去除，接种细胞至新的培养皿。若是不去除，组织块有大有小，移液管不能顺利吸取。你可以把去除的组织连同培养液加入到一个新培养瓶，让它继续长细胞。只要细胞长出来了，什么时候去除组织块不是大问题。

单个核细胞

回复 shunanqi 的帖子
$ F1 q0 ^. [  T0 F- W% k- S  M; ]9 k& w4 j% w
组织块贴壁培养中，可以不用换液，等到组织周围长出适量细胞来，你再换一次，这时候可以去掉脱落的组织块。然后过3天左右（根据细胞生长情况），就可以传代了。