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1.建议不要用96孔板,孔太小,mef容易铺不均匀,改用12孔
; w6 B* J$ e% l6 X# A% C2.挑取得克隆不要吹打的太小,否则不容易长起来$ `$ q: `( w+ Y& Z% c$ C- t
3.不知道你的多能干细胞是人的还是小鼠的,小鼠的一般3天就能长起来,如果是人的,它的生长相对慢一些,建议你多等两天看看。
) H: a1 ]/ Z! Y, H7 U4.如果还是不行,你可以加rock通路的抑制剂Y27632来抑制细胞的凋亡,提高细胞的存活率。
- g' E% n/ s% I M4 _5。96孔板一个孔加100培养基是不是太多了呢,我一般是加50,加的太多,细胞容易缺氧对存活率也有影响的。
; [$ E9 K% f& ?* n! H6机械吹打时请稍微轻柔一些。
! m& W: k4 Q/ k5 c( l; F希望对你有帮助。 |
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