求助好像ES培养液对铺好的MEF有影响

葱葱

5 b3 t! Q( t7 W, o& D) ~. u0 N% V0 r6 ^# t+ {$ b1 M
大家好，我在做小鼠胚胎干细胞培养实验，我想问一下，把培养好的细胞团移植到新的饲养层前，新的饲养层是否要提前换成ES培养液？我试着换了，好像ES培养液对铺好的MEF有影响，对细胞团也有影响，只是简单地适应问题，还是我换成ES培养液的时间不对？（注：囊胚发育至细胞团期间均在饲养层上，但培养液是普通的培养液，MEF长的很可以，囊胚发育的也不错，细胞团移到新的为ES培养基的饲养层上，MEF有变化，细胞团有很多死亡。）

葱葱

非常感谢，我还想问一下您的饲养层密度是多少?我用的是每毫升2乘10的5次方，这种密度下，囊胚贴壁长起来了，但看着mef很密。另外，我想之所以ES培养液造成MEF部分死亡，估计是ES培养液我配的有问题。。。

葱葱

回复 细胞海洋 的帖子
5 D9 T# q7 t- y( U* R; i6 {0 r5 h" E& \  N! h4 ]
非常谢谢。。。

葱葱

回复 细胞-77 的帖子# T6 P) s0 h; f5 k0 o
1 s; q& b0 d# d2 K6 J8 H! j# i
是的。。我最近在养小鼠囊胚，经历了鸟巢等。已经长出内细胞团了，内细胞团周围应该是滋胚层细胞吧，感觉内细胞像是一个孤岛，饲养层被挤到周围了。你遇到过这种情况吗？+ o8 q" J% l6 H4 J  z! h

葱葱

回复 watchen198891 的帖子
2 b* |9 |9 y- G! o+ ?0 t, y0 e) m
, Q! o% d) r. A请问，你的ES里加2-巯基乙醇了吗？我在想是不是我的配方有问题？你配ES培养液时，100ml加多少LIF，加多少2-巯基乙醇？非常感谢。。。

葱葱

回复 watchen198891 的帖子. e* q! m) [7 o. Q8 P# n
$ ^3 K  i. v- t& H
加ES培养液后，mef没有增殖，反而有一些形态变化，个别的死了。呜呜。。。还算正常不？