ips传代

yuri.2004

你可以先用胰蛋白酶进行一下消化。这个过程要注意消化的温度和时间，注意在倒置显微镜下观察，消化适度后去除消化液，加点培养基，用枪轻轻吹开细胞。然后要经过离心去上清，再加培养基重悬后，分装培养就行了。。 最好有多孔板，方便操作和观察。

yuri.2004

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5 m- B3 _* R% H. F( R' M    按照你的意愿，你也可以把挑出来的细胞加到一个板里进行消化嘛~这样方便一点。
( N* T- {  j0 v$ [) N    滋养层细胞都不是必须的~有一种培养是无饲养层的，直接可以养IPS的~我们这边就是用无饲养层培养的。我看过资料，IPS和滋养细胞对酶的消化程度不同，应该是IPS先消化下来吧，你可以核对一下这个。只要把两种细胞分开了 ，直接用不加饲养层的方法，问题应该不大。不过细胞应该会有个适应过程。

yuri.2004

回复 穿裙子的猫 的帖子1 N4 W: e* c& x. ]

. z3 J. `7 }, e* A你这个是正在诱导IPS吗？看着更像是诱导IPS过程中的图。还有部分饲养层细胞能看到。中间那些细胞团的确是IPS的样子，现在还看不出来是否有分化的。等细胞团足够大了，如果克隆团中间部分有颜色变深发黑，或者很明显的细胞形态变化之类的，那种是出现分化了呢。

yuri.2004

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你这个应该看不出来是不是分化，细胞太少了。不过也有可能性。检测的话，最好复合检测。比如做做OCT4  SSEA-4检测什么的，这样心里更有底。/ c( _9 q" J  v! N5 X
中间的IPS细胞的形态和我们差不多的。我们用的是表皮成纤维细胞做的。酶的话是0.25%的。给你发了个资料书上的干细胞分化后的图，你看看吧~. \* B  `# S8 E2 _