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Yorkshining

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楼主

发表于 2014-1-3 10:22 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

以iPSCs为材料进行电转化，质粒载体是否需要线性化？线性化不与线性化各有什么优劣？

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沙发

发表于 2014-1-3 10:38 |只看该作者

个人推荐还是线性化吧，毕竟细胞在电转时形成的孔道也不是很大，线性化的质粒更容易进行孔道，而且进入之后线性化的质粒更容易暴露结合位点。可以参考应其龙教授在2010敲除P53大鼠文章里面的技术

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genedu

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藤椅

发表于 2014-1-3 13:48 |只看该作者

一般的情况，特别是基因打靶，需要线性化，不过还是以具体情况而定

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Yorkshining

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发表于 2014-1-3 17:20 |只看该作者

非常感谢！

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hjd8886

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报纸

发表于 2014-3-19 12:57 |只看该作者

回复懵懂干细胞的帖子
& L. ]" c6 |8 j7 h/ k+ I4 ~! M% r7 z
之前做电转都没有线性化处理过，这个线性化后的质粒进入细胞后会不会很快的被降解啊？如果不是线性化的，应该可以维持质粒的活性状态，增加其拷贝数，对电转不是更有利吗?

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zhd0506

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地板

发表于 2014-7-17 21:05 |只看该作者

我做的也没有线性化，效率不高，顶多也就百分之十

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