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[请教] 用天津淋巴分离液最后离心力该多少啊   [复制链接]

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楼主
发表于 2014-2-18 10:14 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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做单核时  最后离心收集细胞  用天津的分离液  离心力调600g  离心效果不好 离心后淋巴分离液很浑浊  回收率也只有10%  求各位离心大概多少
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沙发
发表于 2014-2-18 10:21 |只看该作者
也不一定是离心力的问题吧。你是选择缓升缓降的离心模式吗?这种分层的离心,如果用突然急刹的离心模式,也会导致分层不清楚。一般这个离心1500rpm应该够了,差不多200g左右吧
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藤椅
发表于 2014-2-18 11:43 |只看该作者
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% z3 K" w! e) r; V) D2 c9 _
& x+ C" T. z2 G说明书建议400g,20min
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板凳
发表于 2014-2-18 17:36 |只看该作者
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$ G+ E+ e7 `* X( d( K3 a. T2 v( _7 w
600g  15min~20min
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报纸
发表于 2014-2-18 17:37 |只看该作者
回复 a52602589 的帖子  w+ v) L4 }( }) _- e# T- f" N

! ], B$ H5 [1 U8 j* C/ q  x注意“减速”调制最慢的档!!!

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地板
发表于 2014-2-18 17:38 |只看该作者
回复 a52602589 的帖子6 @. U* d5 x/ H. k  n' F) n

  Z* f, K  R3 Q6 {. |% W% o* e往淋巴细胞分离液上加血时很重要,一定要保持界面分层!这样离心效果才好
; T2 }) [/ Z9 }% J* h
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7楼
发表于 2014-2-20 13:28 |只看该作者
1、说明书上说的是400g,所以你还是按照400g的离心力做吧。
& ^/ \/ N6 q/ `+ B1 ~2、淋巴细胞分离液的最适工作温度是20℃,所以离心过程中要注意控制好温度;还有就是如果淋巴细胞分离液温度太低,建议你提前复温。
. {7 h' Z+ p# z9 O  S% l9 ]3、淋巴细胞分离液上加上清液时,要缓慢补加,使得分从清晰。" i/ C) g' F0 J9 \2 O: T4 g
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8楼
发表于 2014-10-16 14:28 |只看该作者
孙帅帅 发表于 2014-2-20 13:28
- q! {! m0 I$ u* R& a6 n- d1、说明书上说的是400g,所以你还是按照400g的离心力做吧。0 {& Y% H* V( q; r5 M
2、淋巴细胞分离液的最适工作温度是20℃,所以 ...

2 N, D8 @) C( Q; h  q6 r孙帅帅同学总结得很好,再加上离心必须关闭离心机刹车几乎就全了。lz多实践一下吧,会好的。
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9楼
发表于 2014-10-16 15:07 |只看该作者
我们实验室2000rpm/min,换算一下,440g的样子。仅供参考
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10楼
发表于 2014-10-18 08:19 |只看该作者
第一:铺板要缓,不要打破界面。第二:升降速度控制,现在实验室是升5降3,主要是降速要很慢。第三:他说的400g,我们做过实验,离下来分层不好,离心力控制在600-700g 最好,时间20 min 。希望能帮到你
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