如何使50ml的外周血在体外培养出10*10的细胞数量

yangpan521

做了多次 总是细胞数量达不到 ，健康人抽血100ml，用培养袋培养 ，最终体积月2.5l,培养基为GT-T551，分3次放出细胞 但每次细胞量1-2X10*9左右，总数量也达不到10*10，为什么，请高手指导

ccst4838318

回复 yangpan521 的帖子
1 W$ I. Q' L- c/ d8 n$ `# e% R3 f$ Y. c* i5 u" K- t, x5 W
你的100ml血液，最总培养体积才2.5L，是不是太少了点，这么大的血量要达到10*10，是很容易的。建议两点1.细胞因子的浓度是否合适，条件允许可以适当加大下因子使用量；2.如果培养过程中细胞增殖速度跟得上传代速度，可以考虑扩大培养体系，100ml的血液，最终培养体系应该有4-5L的。

hwlightning

健康人十三十四天轻轻松松就能上那么多，扩大培养体积。我培养的有的十天就OK了。

yangpan521

回复 ccst4838318 的帖子" {4 p( \* N0 d9 H: e) w; @
2 Z3 x0 {) h  w. t( |, j
请问你用的培养基是GT-T551，还是什么？一瓶就要400多，用4-5L就快3000了，成本很大的) `% L. K  e" e! m; L

xinquan15

我们一般每升都能到3e+6的密度，再长活率会下降，到1E+10，3L左右没问题，10*10还没试过，注意因子，自体血清，和细胞密度的调整

aochongyu

一般50ml血基本十三四天左右就可以达到5×109,按你说的血量应该可以达到10*10，是不是培养方法需要改进

ccst4838318

回复 yangpan521 的帖子
& T' A7 \" z  {* X* K6 }- G5 Q( `( N$ e' ^; p$ o
我们用的也是GT-T551培养基，如果100ml的血液你觉得培养基用量太大，成本高，就选择50ml血液，按照你现在的总体积2L来培养，细胞情况好的话细胞量是能达到6-8×10*9，至少血量上是少了一半

郭丽杰

50mL血用2LT551培养基14天完全可以达到10次方，需要优化你的培养体系

yangpan521

回复 郭丽杰 的帖子
: z- |/ ?; M3 u6 E) G, f- f9 v( L: S3 Z0 n, m
问题是，培养基一直是橙红，也没变黄，不那么多培养基，就一定长吗？
2 X3 o' b5 `" F5 _

ccst4838318

回复 yangpan521 的帖子7 e0 ~5 I+ U2 ?5 L2 A

2 s( Y% W+ n2 G$ t2 s培养基一直是橙红色，说明你细胞状态不好，细胞代谢慢，增长慢，甚至是不增长了，这你就得重新思考下你的培养条件是否合适，或者是外在条件比如培养箱设置，细胞因子是否正确，存不存在误差什么的