2014年 Nature scientific reports上的一篇关于“重组蛋白诱导iPSCs”的读后感

Andyhigh

xray19 发表于 2014-4-6 11:56
9 q6 A# d! g; _. w- Z8 P7 c不好意思，昨天没上传上去

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您是本文作者嘛，很希望您能对本篇文章进行总结和评价！- I8 g" F  M& a: H: D! X
我刚大致看了下，这里与大家分享下我的看法，希望能起到抛砖引玉的作用。
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1. 刚打开文献，查了下杂志的IF，并以为是一篇用4因子（OSNL）诱导鸡体细胞重编程的文章，但看过摘要后发现自己错了，这是一篇”利用重组蛋白探索鸡ESCs 培养体系“的文章，文章具有较好的创新性，给了我一些启发，如在 用蛋白介导体细胞重编程后，是否可以利用重组蛋白 一直维持干细胞的多能性，甚至创建一种新物种ESCs的培养体系，值得尝试。* l) [' F( F* |2 Y- w0 k4 d' A7 S

) L! c& t7 [, g  _4 f% o4 U  w0 Z3 O+ t2. 文章的思路: A. 用EGFP验证9R的功能； B. 国建pCMV-PF-9R-IRES-EGFP载体，瞬时转染293FT细胞，提取蛋白并浓缩； C. 加到鸡ESCs培养体系中，观察传代次数（一系列的检测指标），发现重组蛋白能抑制鸡ESCs的分化，能在体外维持ESCs的多能性
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3. 有一些疑问:  目前哪些物种获得了可以再体外长期传代的ESCs，求高手指教！！！另外文章中超声破碎细胞时的溶液是什么，还有转染效率怎么样（出现绿色的时间和比例，质粒应该没有线性化吧）这点自己比较感兴趣，希望Xray19能告知2 T- ]+ S) J0 W$ C8 a  g

" R. f) t. E- x; u  I4 _( V4. 文章整体比较简单，不过也是一个完整的Story，自己推测应该是一名研究生做的工作。顶一个
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Andyhigh

回复 xray19 的帖子; l8 d1 o3 X# D% \. E
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大鼠的ESCs及培养体系有，猪ESCs也有，但是缺乏培养体系，其他的不太确定，估计绝大部分都没有公认的培养体系。