PBMC提取

zhrt

提取PBMC分层中会有脂肪细胞吗？红细胞层与分离液之间的像絮状物一样的东东是脂肪细胞吗？有时提取的PBMC中也少量含有这种类似物

zhrt

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真是非常感谢啊！这东西如果参杂在白细胞层降不下来，会有啥影响（有时还参杂点微量的血细胞）

eeel

zhrt 发表于 2014-4-1 15:29
: P; |8 h" f/ p# V2 i$ O) J/ W- d提取PBMC分层中会有脂肪细胞吗？红细胞层与分离液之间的像絮状物一样的东东是脂肪细胞吗？有时提取的PBMC中 ...

9 Q. B( h5 |. o% w6 f3 L( @) P
你说的这个东西是有的，特别是大量外周血分离的时候很明显，从上往下看的时候看的特别清楚，这个根据细胞密度来看应该是粒细胞巨噬细胞之类的白细胞，PMBC的分离效果跟离心力、离心时间以及升降速时的加速度的关系比较大，具体参数需要根据具体的离心机和分离液来确定。过了收获的PMBC就明显比较少。

zhrt

回复 真水无香 的帖子2 C6 g- s. I2 R
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是的是的，不知是什么

zhrt

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如果血脂高的话，提PBMC有啥影响

zhrt

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7 C2 d- J7 x1 i. ?: C4 w3 [( V, X我们分离出来分四层，从上往下依次是血清，PBMC层，ficoll分离液层，红细胞层

zhrt

回复 momoenn 的帖子4 w+ M% I7 z: i5 D" |0 w
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我们也是用ficoll白膜层

zhrt

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亲，我做的是用外周血培养cik啊

momoenn

回复 Andyhigh 的帖子, S2 I4 ?* H3 a; H& o6 w
* k% F! o6 E0 e8 V- c6 D
奥，这样啊。因为你用的percoll，不了解情况。我们用ficoll，白膜层没有混杂过红细胞。说一下我自己的分析哈，探讨一下，因为percoll和ficoll分离都是密度梯度离心法，红细胞和淋巴细胞密度不一样，不应该在同一层啊。

momoenn

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: y. f+ ], m, K: X( G& J% n  z2 W/ G1 W5 ~& m; x- n8 h$ N9 ~
奥，你用的percoll，那就不了解情况了。我们用ficoll，白膜层没有出现过红细胞呢