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脐带间充质剥离     [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2014-4-6 15:25 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
剥脐带时可以不剥最外一层皮吗  只取出血管,这样培养出的细胞有问题吗?
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金话筒 优秀会员 帅哥研究员

沙发
发表于 2014-4-6 21:09 |只看该作者
外皮应该是上皮细胞,肯定会对提取的细胞有污染。另外一只怀疑脐带提取的所谓干细胞有很大程度上是被成纤维细胞污染了。
7 |( e: ?; X3 p' A$ n" a( X: D( z8 \
在此顺便问一下,有没有区分标记成纤维细胞的有效方法。特别是从MSC中去除的方法。试过免疫磁珠但不是太好。" ]& g; O; O; P5 n: e) N) q
  [+ Q& d: Z$ T1 a5 _1 ]6 m( I$ I; O
祝好运!
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藤椅
发表于 2014-4-8 09:58 |只看该作者
回复 henryjia 的帖子! g- m7 G( S- @3 e  `
4 }& x+ h5 H0 I: X* x
你说的成纤维细胞是从哪里分化出来的  是从外皮吗?

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板凳
发表于 2014-4-9 10:05 |只看该作者
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回复 星空雾雨 的帖子' r, ?$ M, v- b/ S# H

/ X' N# x* f5 {+ V没事。经过2-3次传代就纯了,你可以用流式做下。
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报纸
发表于 2014-4-9 10:13 |只看该作者
回复 lql2006wh0 的帖子
- |# a6 k% Y& x4 Z% ~+ `  A) _/ O, ~/ h
流式查哪几种细胞 达到什么数量算可以

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地板
发表于 2014-4-9 11:00 |只看该作者
不剥离脐带的外皮羊膜,也能得到脐带间充质干细胞。剥离外膜会比较麻烦,需要耐心,但剥离外膜后培养出的细胞会更纯。
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金话筒 优秀会员 美女研究员

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发表于 2014-4-10 09:33 |只看该作者
不用剥外膜,去血管后,直接往下撕胶就行,撕成一条一条的,然后剪碎
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发表于 2014-4-10 09:51 |只看该作者
回复 星空雾雨 的帖子
/ I" e7 n  i8 I5 k& h! l- d: ?' G" G* y3 y4 J2 c/ d* \+ X
可以的,国外都是不剥离的,外皮不是上皮细胞而是羊膜,所以爬出来的也是间充质干细胞,做各种检测、流式都没有任何影响的
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发表于 2014-4-10 09:54 |只看该作者
回复 星空雾雨 的帖子. {4 k/ e8 n/ b' v
+ V6 ^( x# E7 E% j+ M3 o
阳性:CD73、CD90、CD105  阴性:CD34、HLA-DR,阳性标准在95%以上,一般做出来都是98%、99%左右,阴性5%以内,一般都是2%以内的
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金话筒 优秀会员 帅哥研究员

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发表于 2014-4-11 07:14 |只看该作者
回复 zhangjieyctc 的帖子
8 V6 U3 T' E4 n' x) a8 W  }1 D) B& h5 c" O9 W
难道羊膜最外层细胞不是上皮细胞吗?我的实践经验是必须剥离外皮,开始操作有点难,但是三两次也就熟了。加上脐带很长,练一两根也就会了。不能省略必须的步骤!
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