关于重编程初始细胞的选择

thinktank

大家好，我一直有个疑问就是为什么刚开始研究ips的时候选择成纤维细胞，我也查过资料但是结果不是很理想，所以想问一问各位前辈为什么选择成纤维细胞作为靶细胞？

ciweiyuan

比较好诱导，同时可以做阳性对照，因为很多实验室都诱导成功了。

FreeCell

嘻嘻，因为MEF是细胞人员最熟悉的材料，容易获得和培养，正如E coli是最常用基因工程宿主一样——人择原理

wangshan

比较容易诱导。而且MEF是ESC的feeder cells。

yaolinzhang

回复 thinktank 的帖子4 M7 T# e9 s  u, M* {( L0 J& D' }
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取材广泛；容易诱导，转染方便，如果用淋巴细胞，恐怕就没那么简单了

yiyi8909

最初在小鼠和人细胞的重编程尝试中，成纤维细胞被当作起始细胞群。成体成纤维细胞之前被证明可以在小鼠中通过核移植重编程，小鼠和人细胞均可通过细胞融合重编程。另外，分离成纤维细胞在技术上十分简便，而病人特异的成纤维细胞通过像coriell这样的细胞库也可以很方便的获取。成纤维细胞不仅可以与胚胎干细胞的培养条件兼容，还可以用作胚胎干细胞生长的饲养层细胞，所有这些都让它成为进行直接重编程操作比较切实可行的初始候选细胞群。
0 R! x2 K; t  B2 b自成功重编程成纤维细胞以来，多种小鼠细胞类型包括胃细胞、肝细胞、胰腺β细胞、淋巴细胞、神经前体细胞及人的角质细胞都被成功地重编程。多数这样的实验都采用了遗传标记或其它相关技术来确定供体细胞来源，从而排除了被原有成纤维细胞污染的可能。
+ j, ]- M- L. Q/ e9 \在这些研究中有一个事实浮出水面，细胞类型强烈影响着重编程，包括重编程效率、动力学过程以及重编程因子导入的难易。例如，在重编程小鼠胃和肝细胞的过程中，干细胞特异表达的Fbx15基因的激活比在成纤维细胞中快的多，同时含有更少的病毒整合位点。人的角质细胞比人的成纤维细胞重编程更快更高效。在给定的细胞类型中，重编程因子的有效运送也起着很重要的作用。用腺病毒载体重编程小鼠的成纤维细胞需要的病毒滴度，比重编程肝细胞所需要的病毒滴度高出100到200倍。在一个给定的应用中要选用最佳的细胞类型必须考虑到以下几个方面：1）采用哪些简便的重编程因子；2）给定细胞类型的可能性和简便性；3）细胞的代数和来源。衰老细胞或经过若干次传代培养的细胞可能包含遗传上的损伤，从而会损害最终获取的iPSCs的治疗潜能。同样的道理，来源于不同组织的细胞有可能存在DNA损伤，比如皮肤细胞更有可能积累了紫外线诱导的突变，因此不大适合作为临床应用的供体细胞。总体说来，成纤维细胞依旧是研究重编程过程机制时基础研究的首选，而用于应用研究的iPSCs则需要供体细胞容易获取、含有较少的遗传紊乱以及容易被瞬时转染方法重编程。

thinktank

谢谢各位前辈，在下学习了。