流式双染-这样是否可以

fdgg012345

准备留式双染测各群细胞比例。  [% r% V" _/ H. L) c+ b
有小鼠抗人一抗A，FITC-大鼠抗小鼠二抗B，PE-小鼠抗人二抗C。# |! V: ~) |1 l$ N# c  ^+ G
步骤：先A孵育，洗涤后B孵育，再洗涤后C孵育。7 S8 I2 q. e2 `6 ]1 i: i
两个一抗都是小鼠源性的，但一个是直标，一个是间标，从理论上分析，如果洗涤干净，好像是可以的，但不知实际上是否可行。望各位前辈指导非常感谢。

fdgg012345

不好意思，是  PE-小鼠抗人一抗C

aiver2001

如果你标记的是两种不同蛋白，两种抗体不会互相影响，选择的荧光区分度高，可以同时进行孵育的。开始可以做单标管和双标管对照下比例，如果没问题以后省抗体就可以只做双标了。我现在做的3标都是同时做的，没有问题。

fdgg012345

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3 [4 d6 j' R  x# ^& B) ?恩，谢谢。主要是我的间标一抗和直标是同一来源的，如果一起孵育，到时候加二抗就会和两个都结合了。如果两个都是直标，应该可以尝试一起孵育。