小鼠 分离的骨髓细胞要去除红细胞吗？

hyde

分离小鼠的骨髓细胞用于尾静脉注射移植。分离的骨髓细胞要去除红细胞吗？ 不懂

dudumao17

需要，用红细胞裂解液去除，不然会影响细胞的活力！

hyde

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( Q: s. Z; z$ o) ~; L: F3 {
/ _. U* x4 L  V8 r! R. j! M# f有木有详细的protocol （小鼠骨髓移植）参考学习一下的，谢谢。

CELL007

用红细胞裂解液好一点，细胞会长的好点。红细胞裂解液可以购买现成的；也可以自己配置：NH4CL------1.8675gTris---------0.65g纯水--------250ml再用HCL调节PH到7.2就可以用了，过滤除菌。希望能够帮到你

dudumao17

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& N+ x9 o2 h. D6 N! v/ W! r你是要用骨髓细胞尾静脉移植，还是做小鼠活体的骨髓移植？尾静脉就是直接打进去，骨髓移植，比较需要手法，一般是往股骨里打。从膝盖链接的软骨处，转一个洞，然后打进去

hyde

回复 dudumao17 的帖子) ^$ f$ {" ^/ d% G! ~$ c

5 ]5 L; H& B4 [就是尾静脉注射……是不是裂红就可以不用淋巴细胞分离液？使用淋巴细胞分离液就可以不用裂红了

suning5

裂解后，养几天最好，碎片少很多。若是立即回输，用羟乙基淀粉把红细胞滤去

hyde

回复 CELL007 的帖子' a5 M( U) l+ t: ?1 o# [

6 J: T5 S% u- Q% c我看有人说裂解容易让细胞状态不好？是不是裂解时间太久了？

hyde

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8 R$ C- T- e8 U, t. ~" v. D$ @1 ]# ~2 V3 l7 {& a5 j7 M
可不可以不裂红直接用分离液分离，洗两遍直接移植的？

dudumao17

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0 y0 H3 y, V# f5 H3 @: u
& K3 J$ Y: g! Y9 O& }% Y$ U不是的，如果红细胞多，就需要裂红，和用不用淋巴细胞分离液是两回事儿。淋巴细胞分离液可以分离出单个核细胞，可能由于操作，或者分离液的原因，红细胞会混在里面，所以需要进一步裂红。