关于悬浮成球培养

深海寂寞鱼

7 H% g& V1 q, o. Y1 J% H( o* L) e9 m+ K: V+ R4 O6 z& x/ s& v+ e
回复 limeiying 的帖子
4 Y% ]2 b7 \) V8 x9 O0 A1 B; z/ U- k0 ?/ d
3 W' ~& s. h- I; ?9 M% ~" _
   To limeiying :
) j, K! i$ T' h6 |+ C! B: t' d& T" D. x
   1. 如果细胞球的数量比较多的话，建议你试试shaozi402战友说的差速沉淀法。% y- {5 ~: w$ A" ]0 m
       即，将培养物转移到15 ml离心管中，静置3-5分钟，你可以看到细胞球明显的向离心管底部聚集。然后用移液管轻轻吸去培养基，仅留下底部少量的培养基。
- t. w% h/ _) G* a  Z+ q- Y       这样可以富集细胞球，而去除部分单细胞。优点是简单易行，可以富集多数细胞球。缺点是纯度不够，依旧会有少量的单细胞，也会丢失一些细胞球。( e# G3 Y5 l* U2 m8 ~1 o  ?
% Z+ q7 w: G# ^
    2. 如果细胞球不多，或者需要的细胞球可以不用特别多，那么你可以尝试将倒置显微镜（或者体视镜）放到超净工作台内，用2-20ul的移液器配200ul的黄枪头在显微镜下直接吸取细胞球（或者用口吸针直接吸取细胞球），转移至新的培养基中。0 s# m" d1 Q# D! K& U
       这样的优点是纯度比较高。缺点是通量很低，且需要一定的操作熟练度。不过只要练习自己就能够掌握的。  N. Y' o4 d% ~* o1 K- \

& V0 `. _2 a6 W0 _) v2 ^: U9 @( M: X3 u3 s    3. 听之任之，放在培养箱里继续培养。这些增殖能力差，或者压根不能形成细胞球的单个细胞自然会死掉或者被稀释掉。随着你传代培养，细胞球会自然被富集。
6 X/ O1 V1 ^: m9 B* _: v       其实你在培养中也会发现每次传代后，都会新产生这种单细胞。所以只要不影响实验结果，不要太在意。
3 n: P: Q3 n5 Q4 s- G! s+ Z4 |1 n7 C$ e* V
    以上仅仅是我的一些个人感受，未必符合你的实际情况。欢迎多多交流，共同进步！  Y1 ~  K2 {0 J

' A1 b" ^! S! j- O. }6 d  z9 k