iPS克隆数目如何统计 - ips专区干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

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楼主

发表于 2014-6-20 08:53 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

各位大侠，在iPS实验中有时要说明iPS形成的效率，一个指标就是克隆的数目，请问这个是怎么统计的呢？谢谢！

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mecol

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沙发

发表于 2014-6-20 09:00 |只看该作者

回复 LuXK 的帖子- o% C% J( C9 _) r. U) D' g
0 q Y: D+ x; b3 } R8 M5 y2 m! W
你好，我也准备做这个，有不懂的向你请教，可以吗？

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碧螺春的秋天

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藤椅

发表于 2014-6-20 09:14 |只看该作者

在荧光显微镜下直接计数，数重复孔的克隆数然后取平均值

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LuXK

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板凳

发表于 2014-6-20 09:24 |只看该作者

回复 mecol 的帖子. x: V5 v% Z [1 w
$ a$ J2 N& u; z* [
我也是刚做，也有很多不明白的地方，可以相互交流一下。

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LuXK

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报纸

发表于 2014-6-20 09:25 |只看该作者

回复碧螺春的秋天的帖子
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我用6孔板做的，整个孔的克隆数都要计吗？在显微镜下数也不好数吧？

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heirrii

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地板

发表于 2014-6-20 10:00 |只看该作者

显微镜下数数，在培养皿下面垫上自制的透明的格子纸，可以方便计数，避免重复计数。

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ciweiyuan

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7楼

发表于 2014-6-20 10:24 |只看该作者

种植等量的细胞，把培养皿划分为不同的格子，做好标记，在显微镜下计数克隆数目7 ~' K2 U0 E( V( {! E

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wanglimaomao

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金话筒优秀会员

8楼

发表于 2014-6-20 11:23 |只看该作者

一般多少选取相同大小的视野，然后随机计数克隆个数，多数几个复孔就OK啦。

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碧螺春的秋天

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9楼

发表于 2014-6-21 12:04 |只看该作者

回复 LuXK 的帖子
9 M* x- R/ j" G! z+ j8 w
我们一般用12孔板，每个有三个重复，整个孔的都要数，然后计平均值。显微镜调到合适的倍数，然后移动的时候注意距离，不要漏数或多数，刚开始可能不好掌握移动，也可以通过划线来帮助计数

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LuXK