iPS克隆数目如何统计

LuXK

各位大侠，在iPS实验中有时要说明iPS形成的效率，一个指标就是克隆的数目，请问这个是怎么统计的呢？谢谢！

mecol

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3 Z6 Z' [9 t( h. s- f' l
8 T9 C2 F+ d3 C8 u$ H你好，我也准备做这个，有不懂的向你请教，可以吗？

碧螺春的秋天

在荧光显微镜下直接计数，数重复孔的克隆数然后取平均值

LuXK

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4 Q2 d) c7 w" `( s8 {
8 V  H- ^/ V, f1 h我也是刚做，也有很多不明白的地方，可以相互交流一下。

LuXK

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- U$ T1 ]8 y- S; \  v5 k2 w8 }$ ?, X* n' l
我用6孔板做的，整个孔的克隆数都要计吗？在显微镜下数也不好数吧？

heirrii

显微镜下数数，在培养皿下面垫上自制的透明的格子纸，可以方便计数，避免重复计数。

ciweiyuan

种植等量的细胞，把培养皿划分为不同的格子，做好标记，在显微镜下计数克隆数目# n0 w2 w6 Y" j4 z3 V9 J

wanglimaomao

一般多少选取相同大小的视野，然后随机计数克隆个数，多数几个复孔就OK啦。

碧螺春的秋天

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' q* B$ E! \6 @! w1 z0 Q4 u
我们一般用12孔板，每个有三个重复，整个孔的都要数，然后计平均值。显微镜调到合适的倍数，然后移动的时候注意距离，不要漏数或多数，刚开始可能不好掌握移动，也可以通过划线来帮助计数

LuXK

大家数克隆是用AP染色吗？还是看荧光？